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原生质体活力的测定

(2012-11-18 21:34:20)
标签:

原生质体

活力测定

教育

分类: 疑难问题的解决

原生质体活力的测定

浙科版P24对原生质体培养进行了一定的阐述, 包括原生质体的获得方法,原生质体培养后的一些应用,开拓了植物细胞工程的应用范围。

事实上,原生质体培养前需要对其活力进行检测,很多学生认为可以用质壁分离的方法,说明对原生质体不了解。

原生质体(protoplast)是去除细胞壁,由质膜包裹的裸露细胞由于原生质体失去了细胞壁这一屏障因而使其具有特殊的优点可作为一个单细胞系统用于细胞壁再生、膜的透性及离子转运、细胞分裂与分化、细胞器摄入、病毒侵染机理等基础理论的研究。

纯化的原生质体需经活力测定后方可用于培养。活力测定的方法有:

1根据形态待征判断其活力:原生质体呈绿色(若来源于叶片)及圆而鼓者为活原生质体。

2荧光染料活体染色法:荧光素染料可自由透过细胞膜,在细胞内被酯酶水解为荧光素,后者不能自由透过细胞膜而滞留于细胞内,在荧光显微镜下根据荧光强度即可判断原生质体死活。

3酚藏花红染色法:活原生质体能吸收呈红色,无活性的则不能吸收而无色。

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