兔心脏微血管内皮细胞的分离与培养及质量检测！

兔心脏微血管内皮细胞是组成心脏微血管腔面的单层扁平上皮样细胞，在心血管生理和病理过程中具有重要作用。以下是关于它的详细介绍：

一、组织来源

兔心脏微血管内皮细胞分离自兔的心脏组织。心脏由心肌构成，包括左心房、左心室、右心房、右心室四个腔，其微血管内皮细胞分布于心脏微血管内表面。

二、细胞特性

形态特征：大多呈梭形，也有部分呈多角形，具有典型的内皮细胞形态。

生长特性：属于贴壁细胞，依赖于培养表面生长，在适宜条件下可贴壁生长形成单层细胞层。

功能特性：可产生和分泌多种生物活性物质，对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用，在心脏血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。

三、分离与培养

分离方法：常采用胶原酶 - 中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法，也有公司采用体外灌注法制备。

培养条件：培养时通常需要用 PLL（0.1mg/ml）或明胶（0.1%）包被培养容器，使用含 FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF 等多种生长因子的专用培养基，培养环境为 37、5% CO的饱和湿度培养箱。

传代特性：兔心脏微血管内皮细胞的体外培养周期有限，一般可传 2-3 代，传代比例通常为 1:2。

四、质量检测

一般通过 CD31 或 vWF 免疫荧光鉴定，纯度可达 90% 以上，同时需检测确保不含有 HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

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