微生物学实验室中保存培养基和增菌培养基的特性与用途！

 

百欧博伟生物：在微生物学实验室中，保存培养基和增菌培养基是两类用途不同的关键培养基，分别用于维持微生物的存活与遗传稳定性，以及富集目标微生物（尤其是低浓度样本中的微生物）。以下是两类培养基的详细介绍：

 

一、保存培养基（Preservation Media）

 

保存培养基的核心功能是为微生物提供适宜的环境，减缓其代谢活动，延长存活时间，同时保持菌株的遗传特性稳定，避免变异或死亡。选择时需根据微生物的种类（细菌、真菌、病毒等）和保存期限（短期、中期、长期）设计配方。

 

1、常用保存培养基类型及适用范围

 

培养基名称   主要成分   适用微生物   保存期限  特点

 

营养琼脂斜面 蛋白胨、牛肉膏、琼脂 多数异养细菌 1-3 个月（4） 成分简单，制作方便，适合实验室短期传代保存，需定期转接以维持活力。

 

庖肉培养基 牛肉渣、肉汤、葡萄糖 厌氧细菌 1-6 个月（4） 牛肉渣提供厌氧环境和营养，适合厌氧菌的长期保存，减少氧气对菌株的损伤。

 

马铃薯葡萄糖琼脂（PDA） 马铃薯浸出液、琼脂 真菌（酵母菌、曲霉） 1-3 个月（4） 富含碳水化合物，适合真菌生长和保存，能维持孢子形成能力。

 

吕氏血清斜面 血清、琼脂 苛养菌 1-2 个月（4） 血清提供复杂营养，满足苛养菌对生长因子的需求，保持菌株毒力。

 

半固体琼脂 蛋白胨、牛肉膏 细菌（如志贺菌、沙门菌） 1-6 个月（4） 低琼脂含量形成半固体状态，减少氧气接触，适合兼性厌氧菌的保存，抑制动力强的细菌扩散。

 

2、保存培养基的关键设计原则

 

营养适度：避免过高浓度营养导致微生物过度繁殖消耗资源，或过低营养导致菌株衰退（如添加基础碳源、氮源，减少易分解糖类）。

 

环境调控：根据微生物的氧需求（厌氧、需氧、兼性）调整培养基状态（如庖肉培养基的厌氧环境、半固体的低氧环境）。

 

渗透压平衡：添加盐类维持等渗环境，防止细胞因渗透压失衡破裂（尤其对细菌和酵母菌重要）。

 

低温协同：保存培养基通常需配合低温（4、-20或 - 80）使用，低温进一步减缓代谢，延长保存时间（如斜面培养基 + 4是最常用的短期保存组合）。

 

二、增菌培养基（Enrichment Media）

 

增菌培养基用于从含少量目标微生物的样本（如食品、水、临床标本）中，通过提供适宜的营养和生长条件，促进目标微生物大量繁殖，同时抑制杂菌生长（选择性增菌）或无选择性地促进所有微生物生长（非选择性增菌），以便后续分离和鉴定。

 

1、非选择性增菌培养基（通用增菌）

 

适用于样本中微生物数量少但种类不明确的情况，目的是增加所有微生物的总量，为后续分离提供足够菌量。

 

营养肉汤（Nutrient Broth）：

 

成分：蛋白胨、牛肉膏、NaCl、水（无琼脂）。

 

适用：多数异养细菌（如大肠杆菌、葡萄球菌）的增菌，常用于食品、水样本的前处理，培养后可转接至固体培养基分离单菌落。

 

胰酪大豆胨液体培养基（TSB）：

 

成分：胰蛋白胨、大豆蛋白胨、葡萄糖、NaCl 等。

 

适用：更广泛的细菌增菌，包括苛养菌（如链球菌），常用于药品、化妆品的微生物限度检查，营养更丰富，支持多种细菌生长。

 

2、选择性增菌培养基（靶向增菌）

 

通过添加抑制剂（如抗生素、染料、胆盐）抑制杂菌，同时添加目标微生物偏好的营养物质，实现对特定微生物的富集。

 

培养基名称   主要成分及抑制剂   目标微生物  作用机制

 

亚硒酸盐胱氨酸肉汤 蛋白胨、乳糖、亚硒酸钠 沙门菌属 亚硒酸钠抑制大肠杆菌等杂菌，乳糖和胱氨酸促进沙门菌生长，常用于粪便、食品中沙门菌的增菌。

 

四硫磺酸钠煌绿肉汤（TTB） 蛋白胨、胆盐、煌绿 沙门菌属 胆盐和煌绿抑制革兰阳性菌和部分革兰阴性菌，硫代硫酸钠提供还原环境，适合沙门菌的选择性富集。

 

肠道菌增菌肉汤（EE 肉汤） 蛋白胨、乳糖、去氧胆酸钠 大肠菌群 去氧胆酸钠抑制革兰阳性菌，乳糖促进大肠菌群生长，用于水、食品中大肠菌群的增菌。

 

碱性蛋白胨水（APW） 蛋白胨、NaCl、NaOH 霍乱弧菌 高 pH 环境抑制多数杂菌，蛋白胨提供营养，适合霍乱弧菌在碱性条件下的快速繁殖。

 

甘露醇卵黄多粘菌素琼脂（MYP） 甘露醇、卵黄、琼脂 蜡样芽胞杆菌 甘露醇发酵产酸使菌落变黄，卵黄反应显示卵磷脂酶活性，用于食品中该菌的增菌和分离。

 

3、增菌培养基的设计要点

 

营养强化：针对目标微生物的代谢需求添加特定营养（如沙门菌需要胱氨酸，霍乱弧菌偏好高盐）。

 

抑制杂菌：通过调整 pH、添加抗生素或染料，选择性抑制非目标微生物。

 

培养条件配合：增菌效果需结合温度和时间（如耐热大肠菌群在 44.5增菌，沙门菌在 37培养 18-24 小时）。

 

三、两类培养基的核心区别

 

维度      保存培养基                增菌培养基

 

核心目的  维持微生物存活和遗传稳定  促进目标微生物大量繁殖

 

营养水平  营养适度，避免过度代谢   营养丰富（或针对性添加特定成分）

 

抑制剂   通常不含抑制剂      选择性增菌培养基含特定抑制剂

 

物理状态  多为固体（斜面）或半固体  多为液体（便于大量繁殖）

 

培养时间  长期保存（数周至数月）  短期培养（数小时至 1-2 天）

 

理解两类培养基的特性和用途，有助于在微生物检测、菌种保藏等实验中正确选择和使用，确保实验结果的准确性。

 

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