葡萄糖酵母琼脂培养基的原理和使用方法及应用场景！

 

 

一、培养基的原理

 

葡萄糖酵母琼脂（Glucose Yeast Extract Agar，GYEA） 是一种常用的选择性培养基，主要用于培养酵母菌、霉菌和其他真菌，同时抑制细菌的生长。其原理基于以下成分和功能：

 

1、碳源与能量来源：

 

葡萄糖：提供微生物生长所需的主要碳源和能量。

 

酵母提取物：富含氨基酸、维生素和氮源，支持真菌的代谢需求。

 

2、选择性抑制：

 

通常添加 氯霉素（50-100 μg/mL） 或 庆大霉素，抑制细菌生长，提高真菌的选择性。

 

3、凝固剂：

 

琼脂：提供固体基质，便于菌落形成和观察。

 

4、pH 调节：

 

培养基 pH 通常调至 5.5-6.0，酸性环境更利于真菌生长，同时抑制部分细菌。

 

二、使用方法

 

1、培养基配制

 

配方（1L）：

 

葡萄糖：20 g

 

酵母提取物：5 g

 

琼脂：15 g

 

氯霉素（可选）：0.05-0.1 g

 

蒸馏水：定容至1 L

 

步骤：

 

将葡萄糖、酵母提取物和琼脂加入蒸馏水中，搅拌溶解。

 

调节 pH 至 5.5-6.0（可用稀盐酸或 NaOH）。

 

分装至锥形瓶或试管中，121 高压灭菌 15-20分钟（避免高温破坏葡萄糖）。

 

2、灭菌与倒平板

 

灭菌后冷却至约 50，若需添加氯霉素（热敏感），需在此时无菌操作加入。

 

倒入无菌培养皿，静置凝固。

 

3、接种与培养

 

样品接种：涂布、划线或点种待测样品（如环境样本、食品、临床标本等）。

 

培养条件：

 

温度：25-28（适合大多数真菌）。

 

时间：2-7天（酵母菌通常2-3天，霉菌需5-7天）。

 

4、结果观察

 

酵母菌：形成乳白色、光滑湿润的菌落。

 

霉菌：产生绒毛状或粉末状菌落，可能带有孢子颜色（如黑、绿、白色）。

 

三、注意事项

 

灭菌温度：避免高温长时间灭菌，防止葡萄糖焦化（建议≤121）。

 

氯霉素添加：需在灭菌后冷却至50以下时加入，避免高温失活。

 

污染控制：严格无菌操作，避免杂菌污染。

 

培养时间：霉菌生长较慢，需延长培养时间至1周以上。

 

四、应用场景

 

食品、环境样本中酵母菌和霉菌的分离。

 

临床标本中真菌的初筛培养。

 

研究真菌的生理特性或药物敏感性。

 

通过该培养基可高效富集真菌，同时抑制细菌，是微生物学实验室中常用的真菌选择性培养基。

 

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