麦康凯液体培养基（MacConkey Broth）原理及使用方法！

 

麦康凯液体培养基是一种选择性兼鉴别性液体培养基，主要用于肠道致病菌（如沙门氏菌、志贺氏菌等）的增菌培养和初步鉴别，尤其适用于从含杂菌的样本（如粪便、污水等）中分离肠道革兰氏阴性菌。其核心原理基于选择性抑制和生化反应鉴别，使用时需遵循标准化操作以保证培养效果。

 

一、培养基原理

 

麦康凯液体培养基的功能依赖于成分设计，核心原理包括选择性抑制和生化鉴别两方面：

 

1、选择性抑制：抑制革兰氏阳性菌生长

 

培养基中添加了胆盐（或结晶紫），这两种成分能破坏革兰氏阳性菌的细胞壁结构，抑制其生长繁殖；而肠道革兰氏阴性菌（目标菌）对胆盐 / 结晶紫的耐受性较强，可在培养基中正常生长，从而达到“筛选”目标菌的目的。

 

2、生化鉴别：通过乳糖发酵区分细菌类型

 

培养基含乳糖（碳源）和pH 指示剂（如中性红）：

 

若细菌能发酵乳糖（如大肠杆菌等非致病菌），会产生酸性代谢产物，使培养基 pH 下降，中性红变色（由橙黄色变为红色），培养基整体可能呈现浑浊并伴颜色变化；

 

若细菌不能发酵乳糖（如沙门氏菌、志贺氏菌等致病菌），则不会产酸，培养基 pH 不变，颜色保持初始的橙黄色（仅因细菌生长导致浑浊）。

 

这种颜色差异可初步区分“乳糖发酵菌”和“非乳糖发酵菌”，为后续鉴定提供依据。

 

二、培养基成分（典型配方）

 

 

 

三、使用方法

 

（一）培养基制备（干粉配制）

 

称量与溶解：按说明书称取麦康凯液体培养基干粉（如每 1000mL 蒸馏水加 50g 干粉），加入蒸馏水中，搅拌至完全溶解。

 

分装：将溶液分装至试管或锥形瓶（如试管每支装 5-10mL），注意留有一定空间（避免培养时溢出）。

 

灭菌：121高压蒸汽灭菌 15 分钟（灭菌后 pH 约为 7.3±0.2）。

 

冷却：灭菌后取出，自然冷却至室温（40-50以下），备用（可暂存于 4冰箱，有效期 1-2 周）。

 

（二）样本接种与培养

 

样本处理：待检测样本（如粪便、食品匀浆、污水等）需按比例接种（通常 1:10 稀释，即 1g 样本加入 9mL 培养基中），液体样本可直接取 1mL 加入 9mL 培养基。

 

接种操作：用无菌吸管吸取样本，加入灭菌后的麦康凯液体培养基中，轻轻混匀。

 

培养条件：将接种后的培养基置于36±1恒温培养箱中，培养 18-24 小时（若样本中菌量较少，可延长至 48 小时）。

 

（三）结果观察与后续处理

 

结果判断：

 

若培养基浑浊（说明有细菌生长），且颜色变为红色（或局部变红）：提示可能存在 “乳糖发酵菌”（如大肠杆菌）；

 

若培养基浑浊，但颜色保持橙黄色：提示可能存在 “非乳糖发酵菌”（如沙门氏菌、志贺氏菌），需进一步分离鉴定。

 

注：若培养基未浑浊，说明无目标菌生长或菌量极少，需结合样本情况判断是否重新接种。

 

后续操作：对疑似“非乳糖发酵菌”的阳性样本，需转种至麦康凯固体培养基进行分离纯化，再通过生化试验或血清学试验确认菌种。

 

四、注意事项

 

无菌操作：制备、接种过程需严格无菌，避免杂菌污染（尤其是革兰氏阳性菌，可能干扰结果）。

 

灭菌控制：灭菌时间和温度需准确（过度灭菌可能破坏营养成分，灭菌不足易污染）。

 

样本新鲜度：样本需尽快接种（如粪便样本应在采集后 2 小时内处理，否则可能因杂菌过度繁殖影响结果）。

 

储存条件：灭菌后的培养基需避光、4冷藏，避免反复冻融；若出现浑浊、沉淀或颜色异常，不可使用。

 

五、应用场景

 

临床检验：粪便样本中肠道致病菌的增菌（如沙门氏菌感染检测）；

 

食品卫生：食品、饮用水中肠道致病菌的筛查；

 

环境监测：污水、土壤中革兰氏阴性致病菌的初步分离。

 

通过选择性抑制和生化鉴别，麦康凯液体培养基能高效富集目标菌并初步区分类型，是肠道致病菌检测的经典前处理工具，其结果需结合固体培养基分离和进一步鉴定才能最终确认菌种。

 

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