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细胞培养领域中的基础培养基和经典培养基知识解析!

(2025-08-26 15:22:29)
标签:

知识

教育

文化

分类: 培养基

    细胞培养领域中的基础培养基和经典培养基知识解析!

 


百欧博伟生物:在细胞培养领域,有多种经典且广泛使用的培养基,它们针对不同类型的细胞和实验需求进行了优化。以下是一些最著名和常用的经典培养基:

 

一、基础培养基 (最常用和核心的类别)

 

DMEM

 

特点:由 Eagle's MEM 改良而来,含有更高浓度的氨基酸和维生素,以及更高浓度的葡萄糖(通常为 4.5 g/L,称为“高糖 DMEM”)。也有低糖版本(1 g/L)。

 

应用:适用范围极广,是最常用的基础培养基之一。适用于多种贴壁细胞系,如 HeLa(人宫颈癌细胞)、HEK293(人胚肾细胞)、成纤维细胞、肌细胞、神经胶质细胞等。高糖版本尤其适合快速增殖或代谢旺盛的细胞(如肿瘤细胞、胚胎干细胞)。

 

MEM

 

特点:最古老的经典基础培养基之一。成分相对简单,含有细胞生长所需的最基本氨基酸、维生素和盐。不含铁离子。有 Earle's 盐和 Hanks' 盐两种缓冲体系。

 

应用:适用于多种贴壁细胞系,如 HeLa、MRC-5(人胚肺成纤维细胞)、Vero(非洲绿猴肾细胞)。是很多更复杂培养基的基础。

 

RPMI

 

特点:设计初衷是用于悬浮细胞培养。含有还原型谷胱甘肽和高浓度的维生素。缓冲体系通常基于碳酸氢盐。

 

应用:特别适用于淋巴细胞、造血细胞、杂交瘤细胞和许多肿瘤细胞系。也常用于悬浮或半贴壁细胞。

 

IMDM

 

特点:在 DMEM 基础上进一步改良,含有更高浓度的氨基酸、维生素和无机盐(包括硒),以及HEPES缓冲剂和丙酮酸钠。营养成分非常丰富。

 

应用:适用于高密度培养、快速增殖细胞和对营养要求苛刻的细胞,如杂交瘤细胞、某些淋巴细胞、巨噬细胞、胚胎干细胞(常与血清替代物联用)。

 

Ham's F-10 / F-12

 

特点:最初设计用于无血清培养中国仓鼠卵巢细胞。含有更广泛的成分,包括微量元素(如锌、铜)、脂类前体、次黄嘌呤和胸苷。

 

应用:

 

F-10: 常用于原代细胞培养(如人二倍体成纤维细胞)、羊水细胞培养。

 

F-12: 应用更广泛,常与其他培养基混合使用。单独或混合用于原代细胞(尤其是上皮细胞、内皮细胞)、神经细胞、干细胞培养。DMEM/F12 是无血清或低血清培养许多细胞类型(包括神经干细胞、间充质干细胞)的常用基础。

 

二、无血清培养基 (不含动物血清,成分明确)

 

神经添加剂系列

 

特点:化学成分限定、无血清、无动物成分的培养基,专门针对间充质干细胞或人多能干细胞优化。

 

应用:用于维持和扩增 MSCs 或 hPSCs(hESCs/iPSCs),提供更稳定、更一致、减少批次差异的培养环境。

 

神经基础培养基

 

特点:无血清培养基,专为神经元细胞(尤其是原代大鼠海马神经元)设计。

 

应用:维持原代神经元(大鼠、小鼠、人)的长期存活、生长和分化,抑制胶质细胞过度增殖。

 

三、特殊用途培养基

 

无血清角质形成细胞培养基

 

特点:专为表皮角质形成细胞设计的无血清培养基,通常需要添加 EGF 和牛垂体提取物。

 

应用:培养原代和永生化的人表皮角质形成细胞。

 

内皮细胞生长培养基

 

特点:各大厂商提供的专门配制的培养基(常含基础培养基,并添加多种生长因子和添加剂包)。

 

应用:培养原代人脐静脉内皮细胞、微血管内皮细胞等。

 

选择培养基的关键因素

 

细胞类型:这是最重要的因素。不同细胞有不同的营养需求和偏好(贴壁 vs 悬浮)。

 

培养目的:是维持生长、扩增、诱导分化、生产蛋白还是进行特定实验(如转染、毒性测试)?不同目的可能需要不同培养基或添加物。

 

是否含血清:血清(如胎牛血清 FBS)提供生长因子、激素、粘附因子等,但成分复杂、批次差异大、有潜在安全风险。无血清培养基成分明确、批次稳定、安全性高,但开发或优化成本高,可能不适合所有细胞。基础培养基通常需要添加血清(5-20%)才能支持大多数细胞生长。

 

缓冲体系:常用碳酸氢盐/CO2 体系。某些培养基(如 IMDM)添加了 HEPES,提供额外的缓冲能力,对开放式操作(如显微镜观察)或 CO2 控制不精确的环境有帮助。

 

葡萄糖浓度:高糖(如 DMEM 高糖)常用于代谢旺盛细胞(如肿瘤细胞、干细胞),低糖可能用于某些特殊细胞或减少乳酸积累。

 

添加剂:抗生素(青霉素/链霉素)、谷氨酰胺(细胞必需氨基酸,在培养基中不稳定,常单独添加)、非必需氨基酸、丙酮酸钠等常根据需求添加。

 

总结

 

DMEM, MEM, RPMI-1640 是最基础、最通用、应用最广泛的经典基础培养基。

 

IMDM 营养更丰富,适用于要求高的细胞。

 

DMEM/F12 是原代细胞、干细胞无血清/低血清培养的常用基础。

 

在选择培养基时,务必参考针对你特定细胞类型和实验目的的标准操作程序或已发表的文献。

 

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