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肠道菌增菌液体培养基的原理和实验现象及注意事项!

(2025-08-14 15:14:38)
标签:

技术

方法

注意事项

分类: 培养基

    肠道菌增菌液体培养基的原理和实验现象及注意事项!

 


肠道菌增菌液体培养基的原理和实验现象如下:

 

一、原理

 

1、选择性抑制

 

抑制剂:添加胆盐、亮绿、亚硒酸盐等成分,抑制革兰氏阳性菌和部分非目标革兰氏阴性菌(如变形杆菌)。

 

作用机制:破坏杂菌细胞膜或干扰代谢,为目标菌(如沙门氏菌志贺氏菌)创造生长优势。

 

2、营养富集

 

高营养基质:含蛋白胨、酵母提取物等,提供氨基酸、维生素等必需养分。

 

缓冲系统:维持pH稳定(通常7.0-7.4),适应肠道菌生长需求。

 

3、目标菌特异性促进

 

针对不同目标菌优化配方,例如:

 

TTB(四硫磺酸盐煌绿增菌液):硫代硫酸钠+碘→四硫磺酸盐,抑制杂菌并促进沙门氏菌生长。

 

SC(亚硒酸盐胱氨酸增菌液):亚硒酸盐抑制非沙门氏菌,胱氨酸中和毒性,增强沙门氏菌增殖。

 

二、实验现象

 

1、浑浊度增加

 

阳性结果:培养后培养基变浑浊(细菌大量繁殖)。

 

阴性结果:保持澄清(无菌或目标菌未生长)。

 

2、产气现象

 

部分肠道菌(如大肠杆菌)发酵产气,可在杜氏管中观察到气泡聚集。

 

3、颜色变化

 

指示剂反应:若含pH指示剂(如酚红),产酸时变黄(如大肠杆菌);产碱时变红(如部分沙门氏菌)。

 

褪色:含亮绿的培养基可能因细菌代谢褪色。

 

4、菌膜/沉淀形成

 

志贺氏菌:可能在液面形成薄菌膜。

 

沙门氏菌:均匀浑浊或伴颗粒沉淀。

 

5、特殊代谢表现

 

硫化氢产生:沙门氏菌在TTB中生成黑色沉淀(FeS)。

 

三、典型应用示例

 

 肠道菌增菌液体培养基的原理和实验现象及注意事项!


 

四、结果解读注意事项

 

浑浊≠目标菌:需转接选择性平板进一步分离鉴定。

 

无浑浊可能原因:样本无菌、抑制剂过强、培养条件不当。

 

需结合革兰染色、生化试验或分子检测确认菌种。

 

通过选择性抑制和营养富集,增菌液显著提高目标菌浓度,为后续分离鉴定奠定基础。实验现象需结合具体培养基配方和目标菌特性综合分析。

 

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