肠道菌增菌液体培养基的原理和实验现象及注意事项!

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分类: 培养基 |
肠道菌增菌液体培养基的原理和实验现象如下:
一、原理
1、选择性抑制
抑制剂:添加胆盐、亮绿、亚硒酸盐等成分,抑制革兰氏阳性菌和部分非目标革兰氏阴性菌(如变形杆菌)。
作用机制:破坏杂菌细胞膜或干扰代谢,为目标菌(如沙门氏菌、志贺氏菌)创造生长优势。
2、营养富集
高营养基质:含蛋白胨、酵母提取物等,提供氨基酸、维生素等必需养分。
缓冲系统:维持pH稳定(通常7.0-7.4),适应肠道菌生长需求。
3、目标菌特异性促进
针对不同目标菌优化配方,例如:
TTB(四硫磺酸盐煌绿增菌液):硫代硫酸钠+碘→四硫磺酸盐,抑制杂菌并促进沙门氏菌生长。
SC(亚硒酸盐胱氨酸增菌液):亚硒酸盐抑制非沙门氏菌,胱氨酸中和毒性,增强沙门氏菌增殖。
二、实验现象
1、浑浊度增加
阳性结果:培养后培养基变浑浊(细菌大量繁殖)。
阴性结果:保持澄清(无菌或目标菌未生长)。
2、产气现象
部分肠道菌(如大肠杆菌)发酵产气,可在杜氏管中观察到气泡聚集。
3、颜色变化
指示剂反应:若含pH指示剂(如酚红),产酸时变黄(如大肠杆菌);产碱时变红(如部分沙门氏菌)。
褪色:含亮绿的培养基可能因细菌代谢褪色。
4、菌膜/沉淀形成
志贺氏菌:可能在液面形成薄菌膜。
沙门氏菌:均匀浑浊或伴颗粒沉淀。
5、特殊代谢表现
硫化氢产生:沙门氏菌在TTB中生成黑色沉淀(FeS)。
三、典型应用示例
四、结果解读注意事项
浑浊≠目标菌:需转接选择性平板进一步分离鉴定。
无浑浊可能原因:样本无菌、抑制剂过强、培养条件不当。
需结合革兰染色、生化试验或分子检测确认菌种。
通过选择性抑制和营养富集,增菌液显著提高目标菌浓度,为后续分离鉴定奠定基础。实验现象需结合具体培养基配方和目标菌特性综合分析。
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