真菌琼脂培养基的原理与使用方法及注意事项与常见问题！

 

一、原理

 

真菌琼脂培养基是一种选择性或非选择性固体培养基，用于分离和培养真菌（如酵母菌、霉菌等）。其原理基于以下特点：

 

营养成分：

 

含碳源（如葡萄糖、麦芽糖）、氮源（如蛋白胨、酵母提取物）及无机盐，满足真菌生长需求。

 

部分培养基可能添加抗生素（如氯霉素、庆大霉素），抑制细菌生长，提高选择性。

 

pH调节：

 

通常调至弱酸性（pH 5.6-5.8），适合真菌生长，抑制细菌繁殖。

 

琼脂作用：

 

琼脂作为凝固剂（浓度1.5-2%），提供固体支撑，便于观察菌落形态。

 

常见培养基类型包括沙氏葡萄糖琼脂（SDA）、马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）等。

 

二、使用方法

 

1、配制培养基

 

按说明书比例称取培养基干粉，加入蒸馏水，搅拌溶解。

 

加热至沸腾，确保完全溶解。

 

分装至锥形瓶或试管中，用棉塞或透气封口膜封口。

 

2、灭菌

 

高压蒸汽灭菌：121、15-20分钟（液体培养基需缩短时间以防成分破坏）。

 

3、倒平板

 

灭菌后冷却至约50（避免烫伤或冷凝水过多）。

 

在无菌操作台内倒入无菌培养皿（厚度约3-4mm），静置凝固。

 

4、接种与培养

 

接种方法：

 

划线法：用接种环蘸取样品，在琼脂表面划“之”字形。

 

涂布法：将样品稀释液均匀涂布于平板表面。

 

点植法：适用于霉菌，用接种针将菌丝块置于培养基中心。

 

培养条件：

 

温度：25-28（多数真菌）或37（部分致病性真菌）。

 

湿度：保持湿润（可放置于培养箱或密封袋中）。

 

时间：2-7天（酵母菌较快，霉菌较慢）。

 

5、观察与保存

 

定期观察菌落形态（颜色、质地、边缘等）。

 

纯化后菌种可短期冷藏（4）或长期冷冻保存（-80）。

 

三、注意事项

 

严格无菌操作，避免污染。

 

若培养基含抗生素，需在灭菌后冷却至50以下添加（避免高温失效）。

 

不同真菌对pH、温度敏感，需根据目标菌种调整条件。

 

废弃培养基需高压灭菌后处理，防止病原扩散。

 

四、常见问题

 

污染：检查灭菌条件或操作是否规范。

 

真菌不生长：调整培养基配方或培养条件。

 

琼脂不凝固：可能因灭菌时间过长或pH不当导致琼脂分解。

 

通过以上步骤，可有效培养和观察真菌，适用于科研、临床或工业应用。

 

北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在微生物菌种查询网中获得优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！