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胎牛血清在细胞培养中变浑浊的原因与影响及应对措施!

(2025-07-22 16:22:21)
标签:

知识

影响

应对措施

分类: 培养基

  胎牛血清在细胞培养中变浑浊的原因与影响及应对措施!

 


百欧博伟生物:在细胞培养的过程中,胎牛血清作为一种极为重要的营养来源,被广泛用于提供细胞生长所需的多种营养成分。然而,在实际操作中,研究者们有时会发现胎牛血清变得浑浊,这不仅影响了细胞的正常培养,还可能引发对血清品质的担忧。

 

一、胎牛血清的重要性

 

胎牛血清是从未接触过外界的胎牛血液中提取的天然成分,因其含有丰富的细胞生长因子、激素、维生素、氨基酸等营养物质,成为细胞培养中不可或缺的营养添加剂。与新生牛血清、小牛血清和成牛血清相比,胎牛血清的抗体含量较低,降低了与培养细胞发生交叉反应的风险,是理想的细胞生长补充剂。

 

二、胎牛血清浑浊的原因

 

胎牛血清变得浑浊,可能是由于以下几种原因造成的:

 

1、纤维蛋白沉淀:纤维蛋白是参与凝血过程的蛋白之一,在血清收集和快速处理过程中,部分纤维蛋白原(可溶性的形成絮状纤维蛋白的前体)可能仍处于溶解状态。然而,当血清经过最后的过滤分装后,这些纤维蛋白原会在瓶中凝结,形成肉眼可见的大块沉淀(可达1-2mm),从而导致血清浑浊。

 

2、磷酸钙沉淀:磷酸钙是另一种常见的沉淀物,它会使血清呈现轻微的浑浊状态。尤其在37的培养环境中,磷酸钙沉淀的数量会增加。在显微镜下观察,这些沉淀物像小黑点一样,由于布朗运动而呈现活动状态,常被误认为是微生物污染。

 

3、其他成分沉淀:除了纤维蛋白和磷酸钙外,血清中的胆固醇、脂肪酸酯、一些蛋白质以及脂蛋白等也可能因各种原因发生变性或沉淀,导致血清浑浊。这些成分在血清中的稳定性受到多种因素的影响,如温度变化、反复冻融等。

 

4、温度变化:血清在解冻过程中,如果温差骤变,容易造成蛋白质等成分的变性或沉淀。例如,水浴融化可能会导致沉淀增多。此外,血清解冻时冰块和蛋白融化速度不一致,也可能导致局部蛋白浓度过高而产生沉淀。

 

5、反复冻融:解冻后的血清如果再次冷冻,反复多次冻融会影响血清中的蛋白质和生长因子的稳定性,导致沉淀增多,进而使血清变得浑浊。

 

三、对细胞培养的影响及应对措施

 

虽然胎牛血清的浑浊现象不会对细胞培养产生直接影响(大多数研究者及血清生产商已证明这一点),但过多的沉淀物可能会影响血清的过滤和使用效果。因此,在实验室中,一般不推荐对用于细胞培养的血清进行再次过滤处理。如果血清中出现大量沉淀物,可以通过离心处理去除沉淀物,将上清液直接加入到培养基中一起过滤使用。

 

为了避免胎牛血清浑浊现象的发生,建议采取以下措施:

 

1、正确的解冻步骤:在解冻血清时,应遵循正确的解冻步骤,并确保溶解过程中每隔一段时间均匀而缓慢地摇动血清,以减少沉淀物的产生。

 

2、避免反复冻融:尽量减少血清的反复冻融次数,以保持血清中蛋白质和生长因子的稳定性。

 

3、适当的储存条件:长期储存时,应将血清置于2-8的冷藏环境中,并避免在室温下放置时间过长。

 

四、结论

 

胎牛血清在细胞培养中起着重要的作用,但其浑浊现象却时有发生。通过深入了解胎牛血清浑浊的原因,并采取有效的应对措施,我们可以更好地利用这一营养添加剂,为细胞提供一个稳定、适宜的生长环境。同时,这也提醒我们在细胞培养过程中要时刻关注细节,确保每一步操作的准确性和科学性。

 

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