假单胞菌荧光色素培养基配方与培养方法及注意事项！

 

假单胞菌（如铜绿假单胞菌 Pseudomonas aeruginosa 和荧光假单胞菌 Pseudomonas fluorescens）产荧光色素的特性与其代谢产物（如绿脓菌素 pyocyanin 和荧光素 pyoverdine）密切相关。以下是为促进这类荧光色素产生而设计的常用培养基及培养方法：

 

1、King's A 和 King's B 培养基

 

这两种培养基广泛用于假单胞菌的荧光色素检测和代谢研究：

 

(1) King's A 培养基

 

用途：促进 绿脓菌素（pyocyanin） 的产生（铜绿假单胞菌特有）。

 

配方（1L）：

 

蛋白胨（Proteose peptone）：20 g

 

甘油（Glycerol）：10 mL

 

无水硫酸镁（MgSO）：1.5 g

 

磷酸氢二钾（KHPO）：1.5 g

 

琼脂（可选）：15 g（固体培养基）

 

pH：7.2 ± 0.2

 

(2) King's B 培养基

 

用途：促进 荧光素（pyoverdine） 的产生（多种假单胞菌均产）。

 

配方（1L）：

 

蛋白胨（Proteose peptone）：20 g

 

甘油（Glycerol）：10 mL

 

无水硫酸镁（MgSO）：1.5 g

 

磷酸氢二钾（KHPO）：1.5 g

 

琼脂（可选）：15 g（固体培养基）

 

pH：7.2 ± 0.2

 

2、培养方法

 

培养条件：

 

温度：30–37（铜绿假单胞菌通常用37，荧光假单胞菌用30）。

 

时间：24–48小时（荧光色素通常在18–24小时后可见）。

 

观察方法：

 

在长波紫外线下观察菌落或液体培养物，荧光素会发出蓝绿色荧光。

 

绿脓菌素（pyocyanin）为蓝绿色色素，在可见光下可直接观察。

 

3、其他可选培养基

 

假单胞菌分离琼脂（Pseudomonas Isolation Agar, PIA）：

 

含 Irgasan（三氯生），选择性抑制其他细菌，促进假单胞菌生长。

 

胰蛋白酶大豆琼脂（TSA）或肉汤（TSB）：

 

通用培养基，假单胞菌可生长并产荧光，但色素产量可能较低。

 

4、荧光色素的鉴别

 

铜绿假单胞菌：

 

同时产 pyocyanin（蓝绿色） 和 pyoverdine（黄绿色荧光）。

 

荧光假单胞菌：

 

主要产 pyoverdine，无绿脓菌素。

 

5、注意事项

 

紫外线防护：观察荧光时需佩戴防紫外线护目镜。

 

铁限制条件：低铁环境（如 King's B 培养基）可增强荧光素（pyoverdine）的合成。

 

商业化试剂：部分公司提供预制的假单胞菌选择性培养基。

 

通过上述培养基和培养条件，可有效诱导假单胞菌产荧光色素，用于菌种鉴定或次级代谢产物的研究。

 

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