动物细胞培养中血清的来源与种类及选择与使用注意事项!
(2025-05-28 15:52:09)
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动物细胞培养中血清的来源与种类及选择与使用注意事项!
动物细胞培养中,血清提供营养、激素、生长因子等,促进细胞生长。血清分多种类型和等级,选择需考虑细胞需求、品质批次。储存应低温,使用前解冻摇匀。
动物细胞培养中,血清是一种关键的培养辅助物质,对细胞的生长、增殖和分化具有重要作用。以下是对动物细胞培养血清的详细解析:
一、血清的来源与种类
血清是从血液中提取出来的液体部分,它富含细胞生长所需的营养物质、激素、生长因子和其他活性物质。根据来源动物的不同,血清可以分为多种类型,其中最常见的包括胎牛血清(Foetal Bovine Serum,简称FBS)、新生牛血清(Newborn Calf Serum,简称NBCS)、小牛血清(Calf Serum)和成牛血清(Adult Bovine Serum,简称ABS)等。
胎牛血清:采自5~8个月胎龄的牛胚胎,是细胞培养中最常用的血清类型之一。由于其来源的特殊性,胎牛血清中富含多种生长因子和激素,对细胞的生长和增殖具有显著的促进作用。
新生牛血清:采自出生后07天(或030天)内的小牛,其成分与胎牛血清相似,但某些生长因子的含量可能略低。
小牛血清:采自出生30天至1年的小牛,其成分与新生牛血清相近,但随着时间的推移,某些生长因子的含量会逐渐下降。
成牛血清:采自成年牛,其成分相对较为稳定,但某些生长因子的含量可能较低,且可能含有一些对细胞生长不利的成分。
此外,根据血清的处理方式和品质,还可以将其分为特级、优级和标准级等不同等级。特级血清中内毒素含量极低,对细胞的毒性最小;优级血清的内毒素含量略高于特级,但仍适用于大多数细胞培养;标准级血清的内毒素含量较高,可能对某些敏感细胞产生不利影响。
二、血清在动物细胞培养中的作用
提供基本营养物质:血清中含有氨基酸、维生素、无机物、脂类物质和核酸衍生物等细胞生长所必需的物质。
提供激素和各种生长因子:血清中含有胰岛素、生长激素、表皮生长因子、成纤维细胞生长因子等多种生长因子和激素,这些物质对细胞的生长和分化具有重要作用。
提供结合蛋白:血清中的结合蛋白(如白蛋白、转铁蛋白)可以携带重要的低分子量物质(如维生素、脂肪和激素等),对细胞代谢有重要作用。
提供促接触和伸展因子:这些因子有助于细胞贴壁生长,避免机械损伤。特别是在悬浮培养搅拌时,血清蛋白形成的粘度可以保护细胞免受损伤。
对培养中的细胞起到保护作用:血清中含有一些抗蛋白酶成分,可以中和胰蛋白酶的消化作用,保护细胞免受机械损伤。此外,血清还含有一些微量元素和离子,这些物质在代谢解毒中起重要作用。
三、血清的选择与使用注意事项
根据细胞类型选择血清:不同类型的细胞对血清的需求不同。例如,某些细胞可能对胎牛血清特别敏感,而另一些细胞则可能更适合使用新生牛血清或小牛血清。因此,在选择血清时,需要了解目标细胞的生长特性和需求。
注意血清的品质和批次:不同批次、不同来源的血清在成分和活性上可能存在差异。因此,在使用血清时,需要选择品质可靠、批次稳定的血清,并尽量避免频繁更换血清批次,以免影响细胞的生长和实验结果。
血清的储存与处理:血清应储存在-20或更低的温度下,以避免蛋白质变性和细菌污染。在使用前,需要将血清解冻至室温,并轻轻摇匀以确保成分均匀分布。此外,某些实验可能需要对血清进行特殊处理,如热灭活以去除补体等有害成分。但需要注意的是,热灭活可能会导致某些生长因子的失活,因此需要根据实验需求进行权衡。
综上所述,动物细胞培养中的血清是一种重要的培养辅助物质,对细胞的生长、增殖和分化具有重要作用。在选择和使用血清时,需要了解目标细胞的生长特性和需求,并注意血清的品质、批次以及储存与处理等方面的细节问题。
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