防霉抗菌——聚多曲霉的形态描述与培养方法！

聚多曲霉又名喜多式曲霉，属于散囊菌目发菌科曲霉属的一种真菌。可生长在土壤、粪、酒曲、食品、望远镜筒内壁及各种材料的基物上。

一、菌种简介

平台编号：Bio-65560

规格：冻干物

拉丁属名：Aspergillus Sydowii

中文名称：聚多曲霉

属名：Aspergillus

种名加词：sydowii

来源历史：←上海市工业微生物研究所(M219) ←中国科学院微生物研究所

收藏时间：2005.11.25

原始编号：3.3943

资源归类编码：15151913102

模式菌株：非模式菌株

主要用途：研究；分析检测

具体用途：防霉抗菌。

特征特性：菌落呈绒毛状，深蓝绿色，反面呈极深的红色，渗出物丰富。分生孢子穗近球形，典型的辐射状；分生孢子梗无色，光滑；顶囊近球形，表面全部可孕；产孢结构双层；分生孢子球形，有明显的小刺。    

生物危害程度：四类

致病对象：无

培养基：蔗糖 30.0g，NaNO3 3.0g，MgSO4·7H2O 0.5g，KCl 0.5g，FeSO4·4H2O 0.01g，K2HPO4 1.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH6.0～6.5。

培养温度：28

资源保藏类型：培养物

保存方法：真空冷冻干燥法

实物状态：有实物

共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享

用途：研究；分析检测；防霉抗菌。

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、形态描述

菌落在查氏琼脂上257天直径约22mm， 10-12天25-40mm，质地为丝绒状至絮状，致密；颜色呈灰蓝色至暗蓝色，初期稍淡，老后渐深，近于暗蓝灰绿色（Dark Bluish Gray Green,R.XLII）。

白屈菜绿至蒿绿（Celandine Green-→ Artemesia Green,R.XLVII）或板瓦橄榄色（Slate Olive,R.XLVII），间或有淡褐色区域；有辐射形沟纹；通常具大量渗出液，褐色至暗褐色：无气味或具轻微霉味；菌落反面呈淡褐或暗褐色至酱色，近于栗色（Maroon,R.I）或酱红色（Bay,R.II），色素扩散于基质中。分生孢子头球形至辐射形，一般直径为52-125μm，小分生孢子头似青霉状，呈疏松柱形或散乱；

分生孢子梗直接生于基质或生于气生菌丝，孢梗茎长度自几十微米至500μm，一般140-210μm，直径（3.5-）4-8μm，壁较厚，光滑；顶囊较小，近球形或稍呈椭圆形，直径8-15（-20）μm，几乎全部表面可育；产孢结构双层：梗基（4.2-）6-7（-10.4）μm×2-3.5（-4）μm，瓶梗（4.2-）6-8（-10）μm×2-3μm，有的小分生孢子头仅分生孢梗茎顶端稍膨大后生出产孢细胞，有时还可见气生菌丝上直接生有瓶梗；分生孢子为球形或近球形，直径2.5-3.5（-5）μm，壁明显粗糙，具小刺。

菌落在查氏酵母膏琼脂上257天直径15-30mm，10-14无可达40mm；质地丝绒状至厚絮状；边缘白色，2-3mm，内部暗蓝绿色，近于深蓝灰绿（Deep Bluish Gray Green,R.XLII）或暗俄罗斯绿至暗蓝灰绿（Dark Russian Green--Dark Bluish Gray Green,R.XLII）；有时具较稀的辐射状沟纹；渗出液深褐色，出现于中央的沟纹部分；菌落反面褐色至深褐色，色素稍扩散于基质。

三、培养基

*查氏琼脂(Czapek's Agar)

蔗糖 30.0g，NaNO3 3.0g，MgSO4?7H2O 0.5g，KCl 0.5g，FeSO4?4H2O 0.01g，K2HPO4 1.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH6.0～6.5。

四、菌种的培养

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

五、保藏条件

安瓿瓶冻干菌种和培养物应在 2-8°C 保存。西林瓶菌种请置于-20冷冻。甘油保藏温度为-80°C;请勿长期置于室温。

六、注意事项

1）冻干粉首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用无菌吸管吸取 0.3ml 的培养液（即以上建议的培养基配方，不加琼脂）或者无菌水，滴入冻干管中，轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液，接种在培养基上（建议不超过 2 支平板或者斜面，若接种液体培养基，则试管液体不超过 5ml 为宜）；

2）经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间； 若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

3）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

4）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

5）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；

6）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降或不活，请在收到后 2 个月内和微生物菌种查询网联系，逾期不予受理；

7）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

8）安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

9）甘油管使用：使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。