DH5α感受态细胞的特点与培养方法及注意事项！

DH5α感受态细胞是一种可以用于常规质粒高效转化的质粒克隆化学感受态细胞，是实验室最为常用的大肠杆菌菌株之一，广泛用于基因克隆，蓝白筛选，质粒稳定扩增等分子生物学实验。该菌株缺失核酸内切酶(endA)，提高了质粒DNA的产量和质量；重组酶缺陷型(recA) 减少插入片段的同源重组概率，保证了插入DNA的稳定性；lacZΔM15是表达β -半乳糖苷酶α片段的一段基因，当M15缺失(M15)时，lacZ基因虽然能表达ω片段，但不能表达α片段，β -半乳糖苷酶没有活性。

一、基本信息

平台编号：Bio-105941

规格：20×0.05ml

拉丁属名：DH5α感受态细胞

用途：研究

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、产品说明

大肠杆菌DH5α是一种常用于质粒克隆的菌株，在使用pUC系列的质粒进行转化时，可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补，可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。基因型：F-,φ80dlacZM15,(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1。  

三、产品特点

1、DNA稳定性高。

2、有利于高纯度DNA提取。

3、可用于蓝白斑实验

4、转化效率高达1-3×109cfu/μg

四、操作步骤

1、取感受态细胞置于冰浴中，放置10分钟。

2、向感受态细胞中加入1-5μl含有1pg-100ng的质粒DNA，轻轻地敲打4-5下。

3、冰浴30分钟，不要震荡。

4、42热击45-60秒，不要震荡，迅速转移到冰浴中，放置2分钟。

5、加入950μl室温的SOC培养基。

6、混匀后，置于37的摇床上，250rpm震荡培养60min。

7、将含有抗生素的平板加热到37，放置半个小时，使其表面干燥，易于均匀涂布。

8、根据实验要求，取适量转化的感受态的细胞，加到含有抗生素的固体琼脂糖培养基上（LB或SOC），用无菌棒将细胞均匀涂开，将平板置于37培养箱，倒置过夜培养（8-12h）。

五、产品的运输和储藏

干冰运输，收到后请置于-80。

六、注意事项

1、刚刚融化的细胞，转化效率最高

2、避免反复冻融

3、避免用移液枪吸吹

4、整个操作过程要轻柔