铜绿假单胞菌的性质与用途及生产工艺！

一、菌株简介

铜绿假单胞菌（P.Aeruginosa）原称绿脓杆菌。是假单胞菌属的代表菌种。在自然界分布广泛，为土壤中存在的最常见的细菌之一。各种水、空气、正常人的皮肤、呼吸道和肠道等都有本菌存在。本菌是一种常见的条件致病菌，属于非发酵革兰氏阴性杆菌。

革兰阴性杆菌，菌体细长，长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭毛，在暗视野显微镜或相差显微镜下观察可见细菌运动活泼。

本菌为专性需氧菌，生长温度范围25~42，最适生长温度为25~30，特别是该菌在4不生长而在42可以生长的特点可用以鉴别。在血琼脂平板上35培养18-24h，形成大而扁平、湿润、有金属光泽、蓝绿色透明溶血环的菌落，有生姜味。

在麦康凯琼脂平板上，可形成5种不同的菌落：

1）典型菌落：菌落形态不规则，边缘呈伞状伸展。

2）大肠菌样型：菌落圆形凸起，无色透明，似大肠埃希菌。

3）粗糙型：菌落呈纽扣状，表面粗糙，或菌落中央隆起边缘扁平。

4）黏液型：菌落光滑，隆起，呈黏液装，嵌入培养基中，不易挑起，似肺炎克雷伯菌菌落，但菌落成无色半透明。

5）侏儒型：生长缓慢，培养18h尚不见菌落，24h后才有细小菌落。

在普通培养基上可以生存并能产生水溶性的色素，如绿脓素（pyocynin）与带荧光的水溶性荧光素（pyoverdin）等。在血平板上会有透明溶血环。

二、细菌特性

（1）形态染色革兰阴性杆菌，菌体呈球杆状或长丝状，长短不一；单个、呈双或短链状排列；无芽胞，有荚膜，一端有单鞭毛，运动活泼，临床分离株常有菌毛。

（2）培养特性专性需氧菌，部分菌株能在兼性厌氧环境中生长，营养要求不高，在普通培养基上生长良好，可生长温度范围是25~42，最适生长温度35，4不生长而42生长是该菌的鉴别点之一。在血平板、麦康凯平板上均可形成5种不同形态的菌落：

典型型，菌落呈灰绿色，大小不一，扁平湿润，边缘不规则，呈伞状伸展，表面常可见金属光泽；

大肠菌样型，菌落圆形凸起，灰白色半透明，似大肠埃希菌菌落；

黏液型，菌落光滑凸起，呈黏液状；

侏儒型，细小，无光泽半透明菌落；

粗糙型，菌落中央凸起，边缘扁平，表面粗糙。在血平板上常可见透明溶血环，有生姜气味；在液体培养基中呈混浊生长，表面可形成菌膜，在SS琼脂平板上，该菌经过24h培养形成较小无色半透明菌落，一般不易与沙门菌和志贺菌菌落相区别，但经48h培养菌落中央呈棕绿色。铜绿假单胞菌在普通琼脂平板上生长时，可产生多种色素，主要为绿脓素（为铜绿假单胞菌特征性色素）和青脓素（荧光素），前者为蓝绿色。从临床标本分离的铜绿假单胞菌约有80%~90%产生绿脓素和青脓素。

（3）生化反应氧化酶阳性，在OF培养基上，能氧化利用葡萄糖、木糖产酸，精氨酸双水解酶阳性，乙酰胺酶阳性，液化明胶，利用枸橼酸盐，还原硝酸盐并产生氮气，吲哚阴性。

（4）抗原构造铜绿假单胞菌有菌体（O）抗原、鞭毛（H）抗原、黏液（S）抗原和菌毛抗原。O抗原有两种成分：一种是外膜蛋白，为保护性抗原，免疫性强，具有属特异性；另一种为脂多糖（LPS），具有型特异性，可用于细菌分型。

（5）抵抗力铜绿假单胞菌对外界因素的抵抗力比其他无芽胞菌强，在潮湿的环境中能长期生存。对干燥、紫外线有抵抗力，但对热抵抗力不强，临床分离菌株对多种抗生素不敏感。

三、耐药性

铜绿假单胞菌的耐药机制异常复杂，总括之，主要与以下因素有关：

细菌产生抗菌活性酶，如β-内酰胺酶、氨基糖苷钝化酶等。

细菌改变抗菌药物作用的靶位，如青霉素结合蛋白(PBPs)、DNA旋转酶等结构发生改变，从而逃避抗菌药物的抗菌作用。

外膜通透性降低。

生物膜形成。

主动泵出系统；等等。

其中主动泵出系统在铜绿假单胞菌多重耐药机制中起着主导作用。