副溶血性弧菌的实验室检查与防治原则！

副溶血性弧菌（Vibrio parahemolyticus）是1950年从日本一次暴发性食物中毒中分离发现，为一种嗜盐弧菌，需在一定氯化钠浓度的环境中才能生长繁殖。此菌广泛分布于海水、海底泥沙、浮游生物和鱼贝类等海产品和腌制食品中。

由于使用了直接或间接被本菌污染的食品而引起急性胃肠炎。也可引起浅表创伤感染、败血症等。

一、临床表现

主要症状为急性胃肠炎症状。发病初期为腹部不适，上腹部疼痛或胃痉挛，恶心、呕吐、发热、腹泻，之后剧烈腹痛，脐周阵发性绞痛为本病的特点。腹泻是并发症状，多为水样便，重者为黏液便和黏血便。部分患者无恶心呕吐症状。预后一般良好，大多1d~2d后症状减轻，也有因为其他并发症死亡的病例。

二、流行病学特征

副溶血性弧菌引起的食源性疾病多发生在夏秋季（5月~10月），因摄入含有此菌的食物而致病，发病急、潜伏期短。多数在4~28h左右发病，短者2h,长者30h。传染源主要为海产品（鱼、虾、蟹、贝类等）和直接或间接被本菌污染的其他食品。

三、防治原则

动物性食品应煮熟煮透再吃；隔餐的剩菜食前应充分加热；防止生熟食物操作时交叉污染；海产品宜用饱和盐水浸渍保藏（并可加醋调味杀菌），食用前用冷开水反复冲洗。

四、生物学特性

副溶血性弧菌是革兰阴性无芽孢杆菌，易呈多形态，有棒状、弧状、卵圆形、球形、丝状等，排列不规则，多处散在，偶尔有成对排列。最适生长温度37，不适于低温生存，在寒冷的情况下容易死亡。

对高温抵抗力小，56 5~10min即可死亡。本菌对常用消毒液抵抗力很弱，可被低浓度的酚和煤酚皂溶液杀灭。

五、实验室检测

（一）样品采集、送检和保存

1、样品采集

无菌采集有代表性的可疑食物，采集量应大于25g（mL）。水质等外环境样本：用采水器从采样地点采取水质样品500mL,可疑病人污染的外环境，根据情况用无菌棉拭子涂抹被污染的环境物品表面，放10mL增菌液或运送培养基中。疑似病人呕吐物、粪便：副溶血性弧菌耐酸性弱，不易在呕吐物中检出，一般不采集呕吐物检测，主要采集病人粪便或肛拭子。

食物中毒样本应在现场直接接种TCBS等选择平板和增菌液，或放置于Cary-Blair运送培养基中送检。

2、样品保存和运送

样品须常温保存并尽快送检，不宜存放时间过长，防止待检材料冷冻。

（二）病原菌检测

1、样品处理

（1）食品样品：加入到3%碱性蛋白胨水中，37培养8~16h，接种TCBS平板进行培养。

（2）可疑病人样本及可疑病人污染的外环境样本：直接接种TCBS平板，同时增菌8~16h,接种TCBS平板进行培养。

（3）水质等外环境样本：增菌8~16h,接种TCBS平板进行培养。

2、分离培养

将接种的TCBS平板放37培养18~24h，观察菌落特征，挑取可疑菌落，划线接种3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂平板，36培养18~24h，进行生化鉴定。

典型的生化鉴定包括：氧化酶试验、涂片镜检、嗜盐性试验。

副溶血性弧菌氧化酶试验阳性。进行革兰染色镜下观察可见革兰阴性，呈棒状、弧状等多形态无芽孢菌。副溶血弧菌在无盐和10%盐的胨水中不生长，在7%盐的胨水中生长良好。

3、血清学诊断

副溶血性弧菌18~24h培养物用3%盐水制成浓的菌悬液100煮沸后可进行O抗原分群，不经加热的菌悬液进行K抗原分群。

4、致病性检测

在进行中毒检验时，需要对检出的菌株进行致病性检测。使用神奈川现象试验：3%氯化钠胰胨水培养物接种于我妻血平板上，37培养，2h内观察结果，阳性结果在菌落周围有一清晰的β溶血环。