牛链球菌的培养条件与注意事项及打管说明！

牛链球菌是食草动物消化道内的正常菌群，常见于牛的胃肠道和粪便，也可以从狗、大熊猫、单峰驼、黑鹿、羊、考拉和驯鹿等动物的胃肠道和粪便中分离到。牛链球菌也是人胃肠道内的常见菌群，可以从人的胃肠道、粪便、以及食品中分离到。

一、菌种简介

平台编号：Bio-116300

规格：冻干粉

拉丁属名：Streptococcus Bovis

菌种名称：牛链球菌

菌种又名:NCDO 597

其它保藏中心编号：=CGMCC 1.2502 =PCM 5802=ATCC 33317 =NCTC 8177

存储人:NCDO - National Collection of Dairy Organisms

分离来源:牛粪

产品目录号:33317

培养基:ATCC培养基44：脑心浸液琼脂/肉汤

ATCC培养基260：脱脂绵羊血液胰蛋白酶大豆琼脂/肉汤

生长条件:37 , 有氧

生物安全等级:1

模式菌株:是

应用:研究

菌株特点:

ATCC 33317是Streptococcus bovis，牛链球菌。

ATCC 33317能够在ATCC培养基44：脑心浸液琼脂/肉汤、ATCC培养基260：脱脂绵羊血液胰蛋白酶大豆琼脂/肉汤中生长。

Nucleotide (GenBank) : Z95896 Streptococcus bovis sodA gene.

Nucleotide (GenBank) : M58835 Streptococcus bovis 16S ribosomal RNA.

Nucleotide (GenBank) : AF276258 Streptococcus bovis elongation factor Tu (tuf) gene, partial cds.

Nucleotide (GenBank) : AB002482 Streptococcus bovis DNA for 16S rRNA, strain ATCC 33317, NCDO 597.

用途：研究

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用产品信息以出库为准

二、储存条件

冻干菌种和试管斜面请置于 2-8冷藏。西林瓶菌种请置于-20冷冻。

三、培养条件

1、培养基编号：CM0006MRS 培养基

2、培养基成分：酪蛋白胨 10.0g，牛肉膏 10.0g，酵母粉 5.0g，葡萄糖 5.0g，乙酸钠 5.0g，柠檬酸二铵 2.0g，Tween 80 1.0g，K2HPO4 2.0g，MgSO4.7H2O 0.2g，MnSO4.H2O 0.05g，CaCO3 20.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH6.8。推荐使用商品化成品培养基。

3、需氧类型：好氧

4、培养温度：37

四、注意事项

1、菌种常规培养时间：细菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。

2、试管斜面菌种请尽快转接，不建议长期存放。

3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，我单位不负责任。

4、使用者应保证菌种的安全存储和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。

5、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系或更换新的菌种。

五、打管说明书

1、西林瓶开封：用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部，在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖， 注意不要同时打开胶塞。缓慢开启胶塞，用 75%酒精棉消毒瓶口部分，使用无菌吸管注入 0.2ml 适宜的液体培养基复溶冻干粉末。

2、安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉檫试冻干管表面进行消毒，将管顶端于酒精灯外焰上均匀加热；立即滴 2-3 滴无菌水于加热部位，使管壁破裂；再用镊子或其他适宜工具敲下破裂处。菌株恢复培养：用无菌吸管吸取 0.5ml 左右液体培养基(固体培养基去掉琼脂即可)于冻干管中将冻干菌粉全部溶解。将溶解后的菌悬液转移至盛有 4~5mL 液体培养基的试管中混匀，可将残留在吸管中 1-2 滴菌悬液转接至固体培养基上。将液体试管和斜面试管于推荐条件下静置培养。以液体培养结果为准。

3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在 2-8的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，延迟期较长，需要转接至 2-3 代恢复活力。

4、复苏后的菌种在传 1-2 代后使用。

5、暂不启开的安瓿管应于 4中保藏（特殊除外）。冻干管打开后需一次用完，不能留存。

6、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

7、打管操作应在烧杯或托盘上方进行，用完冻干管应灭菌处理后丢弃。

8、如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到菌钟后 2 个月内联系，逾期不予受理。