产酸克雷伯氏菌的分离实验与注意事项！

产酸克雷伯菌中ESBLs和AmpCβ-内酰胺酶的存在形式及其基因类型和转移方式。方法利用CLSI纸片法确认实验和APB纸片增强试验分别检测ESBLs和AmpC酶，基因芯片技术和序列分析测定两种酶基因的类型，接合转移实验了解肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌耐药基因转移方式。

一、基本信息

平台编号：Bio-67740

规格：冻干物

拉丁属名：Klebsiella Oxytoc

中文名：产酸克雷伯氏菌

外文名：Klebsiella oxytoca

定义：出血性结肠炎的一种病原体

属种：克雷伯氏菌属肠杆菌科克雷伯氏菌

其他编号：ATCC 43165=CICC 21518

培养基编号：2

培养温度：37

用途：研究、质量控制

培养基信息

培养基编号：2

名称：Nutrient Agar (营养肉汁琼脂)    

可用于培养菌种：适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌   

备注：Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30gNaCl 5g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2[Note]：When cultivation of Bacillus，5mg of to MnSO4.H2O may be added .It is favorable to promote spore formation

用途：研究、质量控制

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

二、菌株简介

产酸克雷伯菌是抗生素相关性出血性结肠炎的一种病原体. 。产酸克雷伯氏菌属肠杆菌科克雷伯氏菌的一个属种.生物学特征不同于其它克雷伯氏菌种.其致病性与肺炎克雷伯没有差别.从人体的任何感染部位都可以分离出来.

三、分离实验

李树品等人分离筛选到高固氮酶活性菌株产酸克雷伯式菌(Klebsiella oxytoca),可用于提高小麦单位面积产量。Franco Baldi等人分离到的Klebsiella oxytoca BAS-10具有较强的耐受重金属的能力。Ryosuke Sugihara等人将KlebsiellaoxytocaTMN3菌发酵获得胞外多糖AZ-9,并研究了该糖对胶原质诱发的小鼠关节炎的抑制作用,实验表明抑制效果良好。

四、培养基

* 营养琼脂培养基（NA）

* 胰蛋白胨大豆肉汤培养基（TSA）

* LB 培养基（以上三款任选一种即可）

五、保藏条件

斜面和安瓿瓶冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶请置于-20°C 保存。

六、注意事项

1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用无菌吸管吸取 0.3ml 的培养液（即以上建议的培养基配方，不加琼脂）或者无菌水，滴入冻干管中，轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液，接种在培养基上（建议不超过 2 支斜面或平板；或直接接种液体培养基）； 经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间；若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

4）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；

5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系。

6）如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到菌钟后 2 个月内联系，逾期不予受理；

7）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

8）西林瓶开封：用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部，在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖，注意不要同时打开胶塞。缓慢开启胶塞，用 75%酒精棉消毒瓶口部分，使用无菌吸管注入0.5ml 适宜的液体培养基复溶冻干粉末。

9）安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。