啮蚀艾肯菌的培养方法与使用范围及打管说明！

一、菌种简介

平台编号：bio-56722

提供形式：冻干物

拉丁属名：Eikenella corrodens

中文名称：啮蚀艾肯菌

属名：Eikenella

种名加词：corrodens

其它中心编号：ATCC BAA-1152

来源历史：←美国ATCC

收藏时间：2010.11.29

原始编号：Vitek #101889(NSB#81355)

资源归类编码：15131124000

模式菌株：非模式菌株

主要用途：研究；分析检测

具体用途：Vitek 2 NH(苛生菌)鉴定卡质量控制菌。

生物危害程度：三类

致病对象：无

分离基物：临床人的样本

培养基：溶液A：琼脂 5.0g， GC基础琼脂(BD228950)36.0g，蒸馏水 500.0ml；溶液B：脱水牛血红蛋白(BD211275),10.0g，蒸馏水 500.0ml；溶液C：IsoVitaleX(BD 211876)，10.0ml；将溶液A和溶液B在121条件下分开灭菌15min。冷却至50。无菌条件下将B加入溶液A中，混匀。按说明书要求将IsoVitaleX水化，无菌条件下加入培养基中，混匀。* GC基础琼脂(BD228950)；胰酪胨 7.5g；动物组织胃酶消解物 7.5g ；玉米淀粉 1.0ml；磷酸氢二钾 4.0g；磷酸二氢钾 1.0g；氯化钠 5.0g；琼脂 10.0g

培养温度：37

资源保藏类型：培养物

保存方法：-80冰箱冻结法；真空冷冻干燥法

实物状态：有实物

共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享

源数据主键：10434

用途：研究；分析检测；Vitek 2 NH(苛生菌)鉴定卡质量控制菌。

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

二、培养方法

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

三、使用范围

（1）合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。

（2）天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，培养效果好，所以常被采用。

（3）半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。

四、冻干管打管说明

1、安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。

2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液，移植于1-2支建议的培养基试管中，并在建议的条件下培养。

3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在6-10的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需要连续两次继代培养才能正常生长。

4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。

5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4中保藏。

五、特别注意事项

1、微生物菌种应保藏于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时问过长会导致菌种衰退;

2、菌种操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染:

3、斜面菌种保藏时间通常为1-2个月,应根据菌种状况及时转接;冻干菌种保藏时间通常为5~10年;

4、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时与微生物菌种查询网联系或更换新的菌种。