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姜黄素比色法测定土壤有效硼

(2019-01-09 09:11:31)
标签:

土壤有效硼

姜黄素比色法

分类: 检测

原理  

土样经沸水浸提5分钟,浸出液中的硼用姜黄素比色法测定。姜黄素是由姜中提取的黄色色素,以酮型和稀醇型存在,姜黄素不溶于水,但能溶于甲醇、酒精、丙酮和冰醋酸中而呈黄色,在酸性介质中与B结组成玫瑰红色的络合物,即玫瑰花青苷。它是两个姜黄素分子和一个B原子络合而成,检出B的灵敏度是一切比色测定硼的试剂中最高的(摩尔吸收系数ε550=1.80×105)最大吸收峰在550nm处。在比色测定B时应严格控制显色条件,以确保玫瑰花青苷的构成。玫瑰花青苷溶液在0.00140.06mg/LB的浓度范围内符合Beer规律。溶于酒精后,在室温下12小时内安稳。

仪器  

石英(或其他无硼玻璃);三角瓶(250300ml)和容量瓶(100ml,1000ml);回流设备;离心机;瓷蒸腾皿(Φ7.5cm);恒温水浴;分光光度计;电子天平(1/100)

试剂

(1)95%酒精(二级)

(2)无水酒精(二级)

(3)姜黄素—草酸溶液:称取0.04g姜黄素和5g草酸,溶于无水酒精(二级)中,加入4.2ml6mol/LHCl,移入100ml石英容量瓶中,用酒精定容。贮存在阴凉的当地。姜黄素简单分化,最好当天制造。如放在冰箱中,有效期可延长至34天。

(4)B规范系列溶液:称取0.5716gH3BO3(一级)溶于水,在石英容量瓶中定容成1。此为100mg/LB规范溶液,再稀释10倍成为10mg/LB规范贮备溶液。汲取10mg/LB溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml,用水定容至50ml,成为0.20.40.60.81.0mg/LB的规范系列溶液,贮存在塑料试剂瓶中。

(5)1mol/LCaCl2溶液:称取7.4gCaCl2·2H2O(二级)溶于100ml水中。

操作过程

待测液制备:称取风干土壤(通过1mm尼龙筛)10.00g250ml300ml的石英三角瓶(或塑料瓶)中,加20.0ml无硼水。衔接回流冷凝器后煮沸5分钟整,当即停火,但持续使冷却水活动。稍冷后取下石英三角瓶。放置片刻使之冷却。倒入离心管中,加21mol/LCaCl2溶液以加快弄清(但不要多加),离心分离出清液(或过滤到塑料杯中)

测定:汲取1.00ml清液,放入瓷蒸腾皿中,加入4ml姜黄素溶液。在55±3的水浴上蒸腾至干,并且持续在水浴上烘干15分钟除去残存的水分。在蒸腾与烘干过程中显出红色,加20.0ml95%酒精溶解,用干滤纸过滤到1cm光径比色槽中,在550nm波长处比色,用酒精调节比色计的零点。假若吸收值过大,阐明B浓度过高,应加95%酒精稀释或改用580600nm的波长比色。

作业曲线的制作:分别汲取0.20.40.60.81.0mg/LB规范系列溶液各1ml放入瓷蒸腾皿中,加4ml姜黄素溶液,按上述过程显色和比色。以B规范系列的浓度mg/L对应吸收值制作作业曲线。结果核算:有效Bmg/L=C×液土比

式中  C—由作业曲线查得Bmg/L数;液土比—浸提时,浸提剂毫升数/土壤克数。  

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