AF488 NHS ester 是一种胺特异性荧光探针 (Em=525 nm)。AF488 NHS ester 在水和生物样品中，与巯基和胺反应，并在衍生化后改变它们的化学结构和荧光性质。

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　　AF488 NHS ester的生物活性

　　体外研究

　　AF488 NHS ester 的 IgG 荧光标记与抗 IgG 固相肽库筛选

　　(1) 将冻干的 IgG 以 5 g/L 的浓度溶解在 50 mM 磷酸钠、20 mM 氯化钠、PH 8.3 的溶液中。

　　(2) 1 mg AF488 NHS ester 溶于 100 ?L extra dry DMF 中，加入 1 mL (1) 中溶液，室温旋转孵育 1 h。

　　(3) 用 Amicon Ultra 0.5-mL 离心式过滤装置，配有 3-kDa MWCO 过滤器收集样品。

　　(4) 六聚体或四聚体去保护文库在 50 mM 磷酸钠、150 mM 氯化钠、PH 7.4 (PBS) 溶液中以 5× 沉淀树脂体积洗涤三次以平衡。

　　(5) 用 50 mM 磷酸钠、150 mM 氯化钠、0.2% 吐温 (PH 7.4) 溶液稀释 IgG-AF488 至终浓度为 1.3 mg/mL。

　　(6) 将 (4) 和 (5) 在 2-8°C 下孵育过夜。

　　(7) 用 50 mM 磷酸钠、150 mM 氯化钠、0.1% 吐温 20、PH 7.4 (PBS-T) 洗涤树脂珠。

　　(8) 将树脂在 40 ?L PBS-T 的 96 孔板中每孔沉积 1 个珠，然后使用荧光显微镜以 10 倍放大率成像。在 480 nm 激发下，以 510 nm 发射强度为阈值进行 Alexa Fluor 488 荧光测量和荧光筛选。

　　AF488 NHS ester 储存液

　　用 DMF 配制 20 mM 的 AF488 NHS ester。

　　注：AF488 NHS ester 储存液建议分装后于 -20°C 避光保存。

　　MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。