线粒体膜电位 JC-1 Mitochondrial Membrane potential ---本中心流式细胞仪常规检测项目(4)
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检测原理:
JC-1 是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm
的理想荧光探针,JC-1染料以电势依赖性的方式积聚在线粒体内。正常线粒体内,JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物,聚合物发出强烈的红色荧光(Ex=585
nm, Em=590 nm);不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失,JC-1只能以单体的形式存在于胞浆中,产生绿色荧光(Ex=514
nm, Em=529 nm)。
染色步骤:
1.收集细胞:包括漂浮在培养基上的细胞;之后,PBS或培养基重悬送样,正常组细胞分出200μl体积不染色;
2.离心:1000转/分,5分钟,弃上清;
3.染色:加入200μl JC-1染液,混匀,37℃避光孵育15分钟,上机;
4.(可选)洗涤:加入500μl 洗液;
5.(可选)离心:1000转/分,5分钟,弃上清,加入200μl 洗液,混匀,上机。
数据分析:
http://s6/bmiddle/006l4rFwzy6Zja0UgZv65&690JC-1

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