活性氧检测是一种基于荧光染料DCFH-DA（2,7-Dichlorodi -hydrofluorescein diacetate）的荧光强度变化，定量检测细胞内活性氧水平的最常用方法。

DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜。进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不会通透细胞膜，因此探针很容易被积聚在细胞内。细胞内的活性氧能够氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。绿色荧光强度与活性氧的水平成正比。在最大激发波长480nm，最大发射波长525nm处，使用流式细胞仪检测荧光信号。

染色步骤：

1．收集细胞：药物刺激细胞后，收集细胞，无血清培养基重悬，正常组细胞分出200μl体积不染色；

     2．离心：1000转/分，5分钟，弃上清；

     3．染色：加入200μl DCFH-DA染液，混匀，37℃避光孵育20分钟，间混；

     4．洗涤：加入500μl无血清培养基；

     5．离心：1000转/分，5分钟，弃上清，加入200μl无血清培养基，混匀，上机。

数据分析：

http://s5/bmiddle/006l4rFwzy6Zjq5AaAQ44&690Reactive Oxygen Species Assay Kit---本中心流式细胞仪常规检测项目（3）" TITLE="活性氧 Reactive Oxygen Species Assay Kit---本中心流式细胞仪常规检测项目（3）" />