2019年萧山区第十一高级中学中考录取分数线。现将有关事项告知如下。中考结束后，分数线公布在：新浪微博@高考倒计时。本内容由知名专家结合了2019中考大纲（考试说明）并依托最新时事为背景出的，通过此次考试，初三的考生可了解自己的复习备考情况。

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5．(2018·石家庄毕业班质检)资料一：PCR(聚合酶链式反应)三个基本反应步骤是模板DNA在体外加热至95 时解旋成单链，温度降至55 左右，引物与模板单链按碱基互补配对的原则结合，再调至72 左右时，DNA聚合酶沿5′→3′(磷酸到五碳糖)的方向延伸引物合成互补链。三个步骤完成一次称为一个循环。

资料二：图1显示了目的基因及其上限制酶切点，A、B、C、D是四种单链DNA片段；图2是质粒(显示限制酶切点和标记基因)，一般来说，为了使切割后的目的基因与运载体结合，往往使用两种限制酶，同时还要破坏载体上的一个标记基因。根据资料回答下列问题：

 

(1)若利用PCR技术增加目的基因的数量，所用的酶是____________。由图1可知，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取________作为引物，该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生DNA片段________个。

(2)为了提高目的基因和质粒的重组成功率，同时有利于受体细胞的筛选，应该选择的限制酶是______________。如果用限制酶Pst 、EcoR 和Hind 对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切割且每次机会相等，则形成的含有完整抗四环素基因的DNA片段有______种。

(3)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是________________。

(4)对基因组文库的描述，不正确的是________。

A．含有某种生物的全部基因

B．基因中含有启动子和内含子

C．文库的基因是通过受体菌承载的

D．文库中的全部基因可以在物种间交流

答案　(1)Taq酶(或热稳定DNA聚合酶)　B和C　16  (2)Pst 和EcoR 　1　(3)农杆菌转化法　(4)D

解析　(1)利用PCR技术扩增目的基因时，所使用的酶是Taq酶。DNA复制需要引物，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链，因此DNA合成总是从子链的5′端向3′端延伸，因此选用B、C单链DNA片段作为引物。该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生DNA片段共2⁴＝16(个)。(2)为了提高目的基因和质粒的重组成功率，同时有利于受体细胞的筛选，一般选用双酶切法，且选用的限制酶不能破坏目的基因，若选用限制酶EcoR 和Hind ，则载体上的两个标记基因都会被破坏，因此应该选用的限制酶是Pst 和EcoR 。如果用限制酶Pst 、EcoR 和Hind 对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切割且每次机会相等，则只有Pst 和EcoR 切割后会形成含有完整抗四环素基因的DNA片段。(3)常采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞。(4)基因组文库就是把某种生物基因组的全部遗传信息通过克隆载体贮存在一个受体菌克隆子群体中；基因组文库含有某种生物的全部基因，基因中含有启动子和内含子，只有部分基因可以在物种间交流。