1.引物溶解
合成报告单给出了每OD引物稀释为100μmoL/L（即100pmol/ul）浓度的加水量,可以根据实验需要加入适量的双蒸水（PH>6.0）或TE缓冲液（PH 7.5-8.0），开启瓶盖溶解之前最好在3000-4000转/分钟的转速下离心1分钟，防止开盖时引物散失。

2.引物保存
没有溶解的引物非常稳定，可以在-20℃下保存至少1年，溶解好的引物可以事先稀释为100μmoL/L的储存液，分装数份保存于-20℃冰箱，可以保存至少半年以上（反复多次冻融会降低使用寿命）。使用前，将浓溶液稀释成工作液（10 pmol/ml或20 pmol/ml）后进行实验。

这几种膜的特点

质粒的不相容性：指的是原核复制过程中具有相同复制起始位点和利用同一复制体系的质粒存在互相竞争的现象，即分子克隆上讲过的质粒不相容原理，但是质粒在真核细胞内没有复制过程，也就没有这一现象。

严谨性质粒和松弛性质粒：按照复制性质，可以把质粒分为两类：一类是严紧型质粒，当细胞染色体复制一次时，质粒也复制一次，每个细胞内只有1～2个质粒；另一类是松弛型质粒，当染色体复制停止后仍然能继续复制，每一个细胞内一般有20个左右质粒。一般分子量较大的质粒属严紧型。分子量较小的质粒属松弛型。质粒的复制有时和它们的宿主细胞有关，某些质粒在大肠杆菌内的复制属严紧型，而在变形杆菌内则属松弛型。
质粒的传递（转移）：是细菌遗传物质转移的一个重要方式。有些质粒本身即具有转移装置，如耐药性质粒（R质粒）；而有些质粒本身无转移装置，需要通过媒介（如噬菌体）转

　一.磷酸钙转染技术

　　(1)磷酸钙转染的基本步骤
　　最初是由F.L.Graham等人于1973年创立的。基本操作过程包括：
　　①将待转染的外源DNA同CaCl2混合制成CaCl2-DNA溶液；
　　②在不断搅拌过程中，逐滴缓缓地加入到Hepes-磷酸钙溶液中去，形成一种磷酸钙-DNA共沉淀；
　　③然后用吸管仔细转移共沉淀物，使之粘附到培养的哺乳动物单层细胞表面，就会迅速地被细胞所捕获。
保温几小时后，将