Masson染色用于显示组织中纤维的染色方法之一。试剂:Regaud 氏苏木精:苏木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸馏水80ml。

主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别染色。

检验结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色，肌纤维、纤维素和红细胞染红色、胞核染蓝黑色。

masson染色实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ10min-无水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。

2、苏木素染细胞核：masson染色试剂盒内Weigert氏铁苏木素染5min，自来水洗，1%的盐酸酒精分化数秒，自来水冲洗，流水冲洗数分钟返蓝。

3、丽春红染色：masson染色试剂盒内丽春红酸性品红液染5-10 min，蒸馏水快速漂洗。

4、磷钼酸处理：masson染色试剂盒内磷钼酸水溶液处理约3-5 min。

5、苯胺蓝染色：不用水洗，直接用masson染色试剂盒内苯胺蓝液复染5min。

6、分化：1%冰醋酸处理1min。

7、脱水封片：将切片依次放入95%酒精I 5min -95%酒精II 5min-无水乙醇Ⅰ5min -无水乙醇Ⅱ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min中脱水透明，将切片从二甲苯拿出来稍晾干，中性树胶封片。

8、显微镜镜检，图像采集分析。

染色结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色；肌纤维、纤维素和红细胞呈红色；细胞核呈蓝黑色。

1. 苯胺蓝和丽春红要充分溶解然后过滤使用，不过滤的染液里面杂质过多，会阻碍染液和组织的结合紧密程度；

2. 媒染后取出流水冲洗时间不宜过长，时间过长会导致染色效果整体偏淡；

3. 丽春红染完后水洗速度要快，并且进入磷钼酸前尽量将水甩干；

4. 1%的磷钼酸水溶液的作用一方面是使染上红色的胶原纤维被分化成无色或淡红色，而肌纤维、纤维素等仍呈鲜红色；另一方面对胶原纤维又起媒染作用，使胶原纤维与大分子染料的苯胺蓝液较易结合；

5. 1%的磷钼酸水溶液要经常换，溶液明显变色了就需要更换了。