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    近几年，随着基因组医学的发展，通过游离DNA进行无创产前检测，已逐步应用于临床，并引起了外界的广泛关注。

    我们都知道绝大多数人类DNA位于细胞中，但不管是健康的人群还是患病人群，都有小部分DNA位于细胞外，称为游离DNA（cell-free DNA）。外周血中也存在游离DNA, 称为外周血循环DNA（Circulating DNA in plasma or serum）。后来科学家发现，在孕期母体血液中，有一少部分游离DNA来源于胎儿，这一少部分DNA就被称为游离胎儿DNA（cell-free fetal DNA，cff-DNA）。

    1997年，YMD Lo等在国际著名医学期刊《柳叶刀》（Lancet）上，报道了在怀有男胎孕妇的外周血中检测到了Y染色体存在，从而证明了孕妇外周血中存在胎儿的游离DNA。随后，相关研究又发现胎儿游离DNA在孕妇外周血中的检出时间，主要与胎龄有关，胎龄越早胎儿成分相对越少。这一发现对孕妇进行无创产前检测具有重要的诊断意义。

    说到外周血中的游离DNA，目前的文献记录显示是20世纪40年代两位法国科学家Mandel和Metais最早发现的。他们的研究发表在1947年SOCIÉTÉ DE BIOLOGIE DE STRASBOURG 杂志上。这是一篇法语论文。很多关于NIPT的论文都提到了这篇文献，所提供的论文信息一致如下：Mandel P, Me ́tais P. Les acides nucle ́iques du plasma sanguin chez l’homme. C R Acad Sci Paris 1948; 142: 241–243。这两位科学家的这一发现一直未被引起关注，直到60年代循环DNA新进展才重新被人们认识。

    寻找这篇70年前的论文费了些周折，最后在法国的朋友从巴斯德研究所获取到了这篇论文。不过，找来的文献（图1）却显示，除了论文题目、作者以及页数外，其发表的期刊与时间都与目前文献引用的信息有出入（算是一个小插曲，有的时候，我们看到的白纸黑字的信息未必可靠）

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图1  Mandel P与Me ́tais P的发现外周血游离DNA的论文

       1966年，美国纽约洛克菲勒大学的研究人员Henry H Kunkel 博士等人，发现在部分系统性红斑狼疮患者的血清中存在游离DNA。这些DNA可以与血清中某些抗体起反应，从而参与该疾病的病理过程。这项工作1966年发表在 J Clin Invest杂志上（图2）。这个杂志1924年创刊，目前还在发行，2012年影响因子为12.812。

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图2  Henry H Kunkel 等1966年发现在部分系统性红斑狼疮患者的血清中存在游离DNA

    随后，瑞士日内瓦大学的Philippe Anker与Maurice Stroun等发现在肿瘤患者的外周血中存在游离DNA。这两位科学家时任该大学植物生理系学者，因热衷研究肿瘤患者血浆中的循环DNA，研究方向有所偏离，70年代曾几乎被学校除名。经过三十余年的不懈努力，他们的第一部关于循环DNA的专著于2000年出版（图3）。

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    Philippe Anker与Maurice Stroun 在此期间发表了一系列关于外周血游离DNA的论文，主要围绕这些DNA与肿瘤的关系。1987年的一篇论文中，他们对37例恶性肿瘤患者血浆进行了研究，其中10例标本中都分离出了游离DNA。那个时候分子生物学技术刚刚兴起，他们当时采用的还是传统的酚氯仿抽提技术，所需要的外周血量也比较大（需要采集50ml外周血），试验难度可想而知。初步鉴定的血浆游离DNA为双链，大小范围分布约为21Kb~不到0.5kb。在随后的研究中，他们通过一种自己开发的体外DNA合成试验（In vitro DNA Synthesis Test），对癌症患者血浆中的DNA的特性有了基本的判断，这种测试的基本原理是当测试反应中加入致癌剂时，肿瘤源性的DNA链稳定性会下降。到了90年代，在肿瘤患者血浆游离循环DNA上相继检测到了K-ras等基因的突变。

    以上列举的仅仅是外周血循环游离DNA几篇比较有代表性的论著。如同很多其他领域的科学发现和技术发明一样，绝大多数成就都非一蹴而就。正是因为有了这一步步的日积月累，科技才有了日新月异的发展。谁又能想到，七十多年前一个看似不起眼的发现，其引发的新技术变革会给医疗实践带来如此重大的影响！也让我们向那些为科学与技术做出贡献的人们致敬，包括那些大众熟知的科学家们以及更多默默无闻的英雄们！

   这篇文章的准备颇花了一点气力。在此感谢为本文提供灵感以及帮助收集素材的同事们！

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