1 论文标题：实验小鼠四种常见病原微生物多重PCR检测体系的建立

2 作者信息：彭丽娜, 张 曼, 徐汪节*：上海交通大学实验动物中心，上海

3 出处和链接：彭丽娜, 张曼, 徐汪节. 实验小鼠四种常见病原微生物多重PCR检测体系的建立[J]. 微生物前沿, 2025, 14(3): 129-137. https://doi.org/10.12677/amb.2025.143015

4 摘要：目的：建立实验小鼠四种常见病原微生物的多重PCR快速检测方法。方法：对四种病原微生物引物浓度、特异性以及DNA模板的敏感性进行测试，优化多重PCR反应条件；对活体实验动物口腔及粪便样本进行优化处理，简化DNA模板的提取方法。结果：四种病原微生物的多重PCR反应在引物浓度0.15 μmol/L和退火温度56的反应条件下扩增，灵敏度高(绿脓杆菌的敏感性为100 pg，金黄色葡萄球菌的敏感性为1 pg，肺炎克雷伯杆菌的敏感性为10 pg，嗜肺巴斯德杆菌的敏感性为1 pg)且特异性好，与实验动物常见的致病菌无交叉反应。活体实验动物口腔及粪便样本经培养煮沸1 min后即能快速获取检测模板。结论：该方法灵敏特异、简便快速，可为活体实验动物大规模筛查和检测四种病原微生物提供借鉴。