杀孢子剂验证

依据USP和GMP的相关要求，展开杀孢子剂验证，观点仅供参考。

1. 消毒效力验证

1.1 测试内容

（1）使用稀释法测试（在不同的浓度和接触时间下，对比较宽范围的标准测试菌和环境分离菌进行测试，根据消毒剂的功效来进行选择）；

（2）表面挑战试验（使用标准试验微生物和常见的环境分离菌，在使用浓度下将消毒剂敷于表面，在规定的时间内，确定挑战菌的对数减少情况）；

（3）在使用新的消毒剂之前和之后用统计法比较分离菌的频率以及所分离的微生物的数量。

1.2 验收标准

足够的生物体需要被接种在一将被消毒的2英寸×2英寸的表面，例如一个取样管，在预定的接触时间内（例如，10min以上，以及所控制的消毒剂的使用进行观察，超过复苏的时间）证明芽孢至少减少了2个对数，细菌繁殖体，酵母霉菌孢子不小于3个对数。

在使用稀释法或表面挑战研究期间，应证明中和剂的效果以及他们从物料中复苏所接种的微生物的能力。

中和剂（neutralizer）是指在微生物杀灭试验中，用以消除试验微生物与消毒剂的悬浮液中和微生物表面上残留的消毒剂，使其失去对微生物抑制和杀灭作用的试剂。

中和剂对消毒剂有良好的中和作用，对试验用微生物及其恢复期培养无有害或不良影响。

中和剂成分：0.5%硫代硫酸钠，0.2%卵磷脂和1.0%吐温80

1.3 GMP指南建议

应考虑以下几个方面的问题：

（1）基于消毒剂本身的消毒能力进行评价；选择合适的试验方案；审计生产/供应商。

（2）实验室消毒剂效力测试的几种方法：

 硬面测试法；载体法；定量悬浮法

（3）消毒剂的效力验证确认时需要考虑的因素：

消毒剂的效力确认包括两方面内容，现场考察和实验室考察。

a. 现场考察（例如先对现场实际环境中的微生物情况进行监测分析，确定分布情况，选择合适区域按照预先设定的方案进行消毒和消毒后的微生物监测），评估消毒剂对相应设施的实际消毒效力，同时也应注意消毒剂残留。

b. 实验室考察一般使用硬面测试法和定量悬浮法。消毒剂的杀菌效果会受到被消毒表面的类型、接触时间以及相关设施中的微生物种群的影响。

消毒剂的生产供应商一般采用标准方法规定的微生物做效力评价测试，而这些实验菌株可能与用户实际环境中的微生物有较大差别。因此，消毒剂使用企业可用从自己环境中分离的微生物来测定消毒剂对这些微生物的杀灭效果。

通过对环境监测结果的趋势分析，评估清洁/消毒前、后的环境微生物情况。环境监测结果的回顾对确认消毒方法的有效性尤为重要。施行选定的消毒方法一段时间，经历一段足够长时间的数据积累，然后进行趋势分析和总结，以评估消毒剂和消毒程序的有效性。还可以在最差条件下（如预防性维修之后）检测环境的污染状况来获取数据，用于消毒效力评估。