离子色谱中常用的改善分离度方法
(2015-11-07 09:33:49)离子色谱是高效液相色谱的一种,是分析阴离子和阳离子的一种液相色谱方法,离子色谱的分离机理主要是离子交换,有3种分离方式,它们是高效离子交换色谱、离子排斥色谱和离子对色谱。
一.稀释样品对组成复杂的样品,若待测离子对树脂亲合力相差颇大,就要作几次进样,并用不同浓度或强度的淋洗液或梯度淋洗。对固定相亲合力差异较大的离子,增加分离度的最简单方法是稀释样品或作样品前处理。例如盐水中SO42-和Cl-的分离。若直接进样,其色谱峰很宽而且拖尾表明进样量已超过分离柱容量,在常用的分析阴离子的色谱条件下,30min之后Cl-的洗脱仍在继续。在这种情况下,在未恢复稳定基线之前不能再进样。若将样品稀释10倍之后再进样就可得到Cl-与痕量SO42-之间的较好分离。对阴离子分析推荐的最大进样量,一般为柱容量的30%,超过这个范围就会出现大的平头峰或肩峰。小型压片机
二.改变分离和检测方式若待测离子对固定相亲合力相近或相同,样品稀释的效果常不令人满意。对这种情况,除了选择适当的流动相之外,还应考虑选择适当的分离方式和检测方式。例如,NO3-和ClO3-,由于它们的电荷数和离子半径相似,在阴离子交换分离柱上共淋洗。但ClO3-的疏水性大于NO3-,在离子对色谱柱上就很容易分开了。又如NO2-与Cl-在阴离子交换分离柱上的保留时间相近,常见样品中Cl-的浓度又远大于NO2-,使分离更加困难,但NO2-有强的 UV吸收,而Cl-则很弱,因此应改用紫外作检测器测定NO2-,用电导检测Cl-,或将两种检测器串联,于一次进样同时检测Cl-与NO2-。对高浓度强酸中有机酸的分析,若采用离子排斥,由于强酸不被保留,在死体积排除,将不干扰有机酸的分离。
三.样品前处理对高浓度基体中痕量离子的测定,例如海水中阴离子的测定,最好的方法是对样品作适当的前处理。除去过量Cl-的前处理方法有:使样品通过 Ag 型前处理柱除去Cl-,或进样前加AgNO3到样品中沉淀Cl-;也可用阀切换技术,其方法是使样品中弱保留的组分和90%以上的Cl-进入废液,只让 10%左右的Cl-和保留时间大于Cl-的组分进入分离柱进行分离。对含有大的有机分子的样品,应于进样前除去有机物,较简单的方法是用Dionex的前处理柱OnGuard的RP或P柱或在线阀切换除去有机基体。制药纯化水设备