转染实验（脂质体转染法）：

   原理：脂质体是磷脂分散在水中时形成的脂质双分子层，又称为人工生物膜。具有膜的融合及内吞作用，可用作外源物质进入细胞的载体。相对于电穿孔法和磷酸钙共沉淀转染法，脂质体介导转染法简便易行，成本适中，具有较高的转染率和较小的细胞毒性阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用将 DNA分子包裹人内，形成DNA一脂复合体，也能被表面带负电荷的细胞膜吸附，再通过膜的融合或细胞的内吞作用，偶尔也通过直接渗透作用，将DNA传递进入细胞，形成包涵体或进入溶酶体 其中一小部分DNA能从包涵体内释放，并进入细胞质中，再进一步进入核内转录、表达。

操作步骤：

1、取对数生长的细胞，接种于培养板，加培养液，培养过夜（细胞长至85-90%满）；

按说明书进行转染实验：

2、在缓冲液中加入质粒DNA轻轻振荡混匀10s；

3、在缓冲液中加入适量脂质体，轻轻振荡混匀10s；

4、将脂质体混合液慢慢滴加到质粒混合液管中（有的转染试剂规定顺序，有的不规定），振荡混匀10s，室温温育一定时间（20min）；

5、给培养板换液。

6、将转染混合液加入每孔中，于培养箱内孵育一定时间；

7、弃去转染混合液，更换正常培养液，按实验需要分别进行不同的处理。

转染注意事项:

1:优化转染条件（脂质体的用量、DNA密度、细胞密度、脂质体和DNA混合孵育时间）每种细胞和质粒均须进行。
2:预备脂质体/DNA混合物必须在无血清下进行。

3: 在转染之前更换培养基，可提高转染效率，但所用培养基必须37℃预温。
4: 脂质体/ DNA混合物应当逐滴加入，尽可能保持一致，从培养皿一边到另一边，边加入边轻摇培养皿，以确保均匀分布和避免局部高浓度。