浅谈RNA提取常见问题分析
(2019-11-08 15:21:44)
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百代生物-RNA提取常见问题分析
1、RNA得率低
A.样品裂解或匀浆处理不彻底B.RNA沉淀未完全溶解
2、A260/A280<1.65
A.RNA应使用TE Buffer稀释后再进行吸光度值的测定
低离子浓度和低PH值条件下A280值偏高
B.样品匀浆时加的试剂量太少
C.匀浆样品时未在室温放置5分钟
D.吸收水相时混入了有机相
E.RNA沉淀未完全溶解
3、RNA降解
A.组织取出后没有马上处理或冷冻
B.待提取RNA的样品没有保存于-60至-70,而保存在了-5至-20
C.细胞在用胰酶处理时过度
D.溶液或离心管未经RNase去除处理
E.电泳时使用的甲醛PH值低于3.5
4、DNA污染
A.样品匀浆时加的试剂量太少
B样品中含有有机试剂(如乙醇、DMSO等),强缓冲液或碱性溶液
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常州百代生物科技股份有限公司是一批留美归国科学家发起设立的、从事个性化基因研究、检测和实验服务的公司,是2013年常州市重点引进的生物高科技项目。公司主要业务分三部分:科研试剂、诊断试剂和实验服务。科研试剂包括小核酸转染试剂、质粒DNA转染试剂、细胞凋亡检测试剂、DNA聚合酶、逆转录酶、荧光定量PCR试剂等,诊断试剂主要为肿瘤的个性化基因诊断试剂。公司还提供分子生物学和分子病理学实验服务,包括:siRNA序列设计,siRNA细胞株转染、原代细胞转染和活体动物体内转染,荧光定量PCR服务,耐药基因检测,个性化用药基因检测,micro-RNA检测,载体构建,感受态细胞制备,免疫组化,FISH等。
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