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1.BD Aria III高端分选型流式细胞仪介绍

(2014-02-19 09:57:22)
标签:

检测

分类: 流式检测和分选
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1、 能够同时安装多达6根固体激光器,同时使用4根不同波长的激光器。

Aria III标准配置能够同时安装488nm633nm561nm375nm405nm445nm六根不同波长的激光器并同时使用其中的4根,以满足不同科研领域的应用需求,符合现代流式细胞仪技术多激光多色的发展方向。每个激光器都有其特殊的应用,在现代的高级应用中,多色的流式细胞仪实验往往需要4根以上的激光器同时使用。

Beckman公司90年代推出的MOFLO XDP同时只能使用三根激光器,标准配置也无法安561nm375nm445nm激光器,显然已经无法满足现代技术的发展,仪器应用领域窄小,无法满足现在和将来的需求。 


不同激光器,对应不同的应用范围:

1488nm激光:用于细胞表面或胞内蛋白/抗原检测分析,细胞增殖、活性、凋亡及周期和倍性分析,荧光蛋白检测,基因和信号分子检测,细胞器的分析,可溶性蛋白检测等等。是流式细胞仪最常用的激光器之一。可激发的荧光素包括:FITC, PE, PerCP, Alexa Fluor® 488,GFP等。

2633nm激光:用于细胞表面或胞内蛋白/抗原检测分析,基因和信号分子检测等等。是流式细胞仪最常用的激光器之一。可激发的荧光素包括:APCAlexa Fluor® 647BD APC-H7APC-Cy7等。

3561nm激光:用于细胞表面或胞内蛋白/抗原检测分析,可激发的荧光素包括:PEPE-Texas Red®PE-Cy5PE-Cy7RFPmCherry等。其中利用561nm激光器激发PE,可以大大减小PEFITC的光谱重叠,极大提高检测灵敏度和分辨率,从而发现一些以前不能被发现的低表达的细胞群体和特殊表面标志物;同时,561nm激光器可以鉴定RFP转染效果以及追踪转染的细胞,并分选出感兴趣的细胞群;而基于mCherry的双分子荧光互补系统研究(BiFC),更能够检测细胞内蛋白质之间的相互作用,具有简单,快速,直观,灵敏及定位等特点。

4375nm激光:结合BD公司的最新NGX石英流动检测池,可改变以前只能采用大功率355nm激光检测SP细胞的现状。在干细胞和细胞治疗研究中,能够高灵敏和高特异性分析和分选SP侧群细胞。同时,375nm激光可以用于细胞周期检测,尤其适合活细胞的细胞周期倍性分析;钙离子的检测(一种荧光染料实现结合钙和游离钙的同时检测)也可以通过375nm激光检测Indo完成。

5405nm激光:紫色荧光石最新发展出来的一类新型荧光,主要包括Qdot系列,BD Horizon V500AmCyanBD Horizon V450Pacific Blue™荧光素。在流式细胞技术多激光多色的发展方向中,紫色激光是流式技术由6色以下发展到8色和10色的关键激光,其激发的紫色荧光素能够很好的与红色和蓝色共同使用,荧光信号强,荧光干扰少。而Qdot是一种生物学领域和纳米学领域相结合的产物,对于细胞成像来说具有吸收性高、量子产量高等优点,其具有超强的荧光稳定性,光谱范围广,可应用于肿瘤靶标细胞的标记与示踪。

6445nm激光:能够高灵敏和高分辨率地检测CFP荧光蛋白,进行转染效果评估和追踪转染细胞,也是进行细胞内蛋白质之间的相互作用研究的重要手段。同时,445nm激光配合375nm激光,也是染色体检测和分选的主要手段。 

2Aria III能够同时检测18色荧光

加上FSCSSC,共20个信号。

3、 Aria III采用了最新型NGX石英流动检测池

Aria III的用户只要使用375nm激光器就能在NGX石英流动检测池上对SP细胞进行完美的分析和分选。使得昂贵的355nm激光器变得不再需要,可以节约大量的科研经费。 

3、 Aria III将流式细胞分选仪的灵敏度提高到了极限

4、 Aria III将流式细胞分选的自动化程度提高到最高


主机系统

1、流式细胞仪主机系统:含488nm氩离子蓝色激光器,633nm红色激光器,荧光检测通道:6+25个荧光检测器+ssc);

 

2、光路:双激光立体空间激发方式实现多荧光分析;

3、滤光片:488nm激光的荧光通道包括:530/30  585/42  619/23  695/40  780/60

633nm激光的荧光通道: 660/20  780/60

4、检测速度:>100000细胞/秒;

5、荧光检测灵敏度:<125MESF

6、全峰宽变异系数:CV<2%

7、可选用荧光:FITCPEPIPercp-cy5.5PE-Texas RedPE-cy7APCAPC-cy7等;

8、采用电荷式分选系统,软件自动仪器控制和计算分选设置,液滴监控;配有2路、4路试管、微孔板(ACDU)等多种收集装置,样本和分选细胞冷却系统,气溶胶防护系统。配备70um85um100um喷嘴;

9、分选速度速度:>50000个细胞/秒,分选纯度>98% 

BD公司FACS Aria III设计采用了全新理念,极大地简化了高速分选和多色分析的操作和实验要求。可广泛应用于临床检测和科研领域,适用于细胞生物学、免疫学、血液学、肿瘤学、药理学、遗传学、临床检验学等单细胞或其它生物颗粒的定量分析和分选。

1分析功能:

1.1、细胞周期测定,DNA含量分析;

1.2、细胞凋亡检测;

1.3、淋巴细胞及其亚群分析;

1.4、细胞活性检测;

1.5、细胞内细胞因子测定;

1.6、淋巴造血系统及白血病免疫分型分析;

1.7、自身免疫病相关HLA抗原分析;

1.8、抑制免疫中的应用

2.2细胞分选



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