哺乳动物基因表达载体的类型

(1)质粒型表达载体

不带真核复制起始序列的质粒型表达载体，只含原核复制子，质粒载体被转移到细胞后不能以附加体的形式复制，而被整合到细胞的基因组中，并在基因组的调控下以较低的水平进行表达。这类载体带有各种不同的选择标记，可供筛选转化子，如pTK2、pHyg和pRSVneo 等。

目前构建的大多数哺乳动物质粒型表达载体，都带有来源于不同病毒基因组的复制起始序列，这些病毒基因表达调控元件能有效地调节外源基因在哺乳动物细胞中的表达。

(2)SV40衍生的表达载体

在已构建的SV40衍生表达载体中，除含有SV40复制起始序列、早期启动子序列、加poly(A)信号序列、剪接供体和受体信号外，还组入了多克隆位点、选择标记基因、能进行体外翻译的噬菌体启动子、编码SV40大T抗原的附加转录单位等。

SV40衍生表达载体一般作为瞬时表达系统，可在多种哺乳动物细胞中获得低或中等水平表达，在COS受体细胞中可获得高效表达。目前已构建的SV40衍生的表达载体有pMSG、pSVT7 和pMT2 等。

(3)牛乳头瘤病毒(BPV)的表达载体

已构建的BPV衍生的表达载体，带有一段BPV DNA、一种启动子( 如SV40早期启动子)、加poly(A)信号(SV40)、剪接供体和受体信号、选择标记基因等，可在多种哺乳动物细胞中获得表达。该表达载体既可表达基因组DNA，也可表达cDNA序列，对插入的外源DNA大小没有严格限制，相对分子质量一般比较大。

(4)人疱疹病毒(EBV)衍生的表达载体

EBV衍生的表达载体携带有EB病毒复制顺式作用要素(OriP) 的DNA片段，还含有在大肠杆菌中进行增殖的元件、插入外源基因的限制酶位点、选择标记基因等。表达载体可在很多哺乳动物细胞中表达外源基因，对插入的外源基因片段大小也没有严格限制。

(5)人腺病毒衍生的表达载体

人腺病毒基因组中的E1～E4基因，与基因组的复制起始和晚期基因的表达调控相关。在构建人腺病毒表达载体时，将早期基因中的E1和E3基因删除。人腺病毒表达载体具有宿主范围广、稳定性好、表达效率高等特点。

(6)反转录病毒衍生的表达载体

反转录病毒表达载体通常包括下列元件：病毒基因组成分，包括病毒两端LTRs序列、病毒包装识别序列、剪接识别位点序列、加poly(A)信号；在哺乳动物细胞中的选择标记基因有：新霉素抗性基因、潮霉素磷酸转移酶基因、鼠二氢叶酸还原酶基因等；在哺乳动物细胞和细菌中进行复制的起始序列；外源基因在反转录病毒中表达的调控序列。