细胞同步化培养

处于细胞周期不同阶段的细胞在形态和生理上都有很大差别。因此，获得处于同一时期的同步生长的细胞群体，为研究细胞的生长和代谢，尤其是细胞周期和增殖动力学带来很大的便利。细胞同步化是指自然的或人工方法获得的细胞群体的细胞周期同步化生长。细胞周期同步化在有些生物中自然存在。例如，黏菌只进行细胞核分裂，而细胞质不分裂，胞质内大量的细胞核(可多达10⁸)可进行同步分裂。自然同步化的细胞群体并不普遍，在研究中还需要利用人工筛选或诱导获得大量的同步化生长的细胞群体。

(1)选择细胞同步化

细胞在细胞周期的不同阶段中，其体积、密度、黏附度、吸光性等特性都有区别，利用物理与化学的手段可以将它们进行分离和筛选。   

1)M期细胞震摇脱落法    处于有丝分裂期的细胞形状变圆，单层贴壁生长的细胞的附着性降低，摇动或拍打培养瓶很容易使这些细胞脱落。用这种方法获得的细胞，90%~98%处于M期。此法的缺点是收获细胞的数量较少，一般只达到细胞总数的2%左右，在应用中需要与化学诱导法相结合。

2)离心洗脱法    细胞在进行分裂时，细胞体积呈线形增加，利用洗脱离心机可以将体积大小不同的处于不同时期的分离开。对分离收集的细胞进行测量和分析，确定其时期。

3)梯度沉降法    利用含有血清或蔗糖的梯度溶液可以将体积不同、处于不同分裂时期的细胞分离。该方法的最大缺点在于细胞的活力容易受到影响。

(2)诱导细胞同步化

1)血清饥饿法    通过不同的培养方法和药物作用可以诱导获得同步化的细胞。 将血清浓度降低到一定限度，使细胞仅能存活而不能分裂，可以获得大量处G1期的细胞。

2)异亮氨酸营养缺乏法    人们在CHO细胞培养中发现，培养基中缺乏异亮氨酸，细胞将被阻止到 G1期。利用这种方法，CHO细胞系可以获得100%G1期细胞。

3)DNA合成抑制剂阻断法    DNA合成抑制剂均能将细胞阻止在S期，目前常用的包括胸腺嘧啶核苷和含羞草酸等。

4)秋水仙素阻断法利用秋水仙素抑制纺锤丝的形成，可以使细胞分裂停止在有丝分裂中期。

也许浙江省2017年11月考试中的同步化就来自这里，教材中的营养限制性培养也是这个意思。