加载中…蛋白样品脱盐处理方法比较
(2019-02-20 09:37:41)
标签：
蛋白脱盐蛋白脱盐方法 |
分类： 蛋白表达 |
蛋白大分子脱盐要求在样品制备中经常遇到，选择合适的脱盐方法显得非常重要；在蛋白回收率、脱盐效率、蛋白生物活性、操作难易程度、耗时等方面需要综合考虑，找到合适的脱盐方式。
下面对透析法、超滤法、脱盐柱法三种常用的脱盐方式做一个对比分析，为今后选择合适的脱盐方法作为参考。
一、透析法特点：（性价比低）
1.时间长（需要过夜）
2.需要大体积的缓冲液
3.透析袋使用前处理繁琐
4.透析袋可能会破，导致样品丢失，重复使用次数少
5.样品易沉淀失活
6.价格相对低
二、超滤法特点：（性价比一般）
1.时间较长
2.重复使用次数少
3.操作简单
4.蛋白回收率低
5.蛋白易失活
6.价格较高
三、脱盐柱法特点：（性价比高）
1.时间短
2.重复使用次数多
3.操作简单温和不易失活
4.蛋白回收率高
5.价格相对低
脱盐柱法案例
层析柱：1.6cm*20cm中压玻璃层析柱,装填千纯生物Pudex G25 medium填料（柱体积40ml）
样品：IgG、BSA、Lysozyme（各1mg/mL）
上样量：流速为50cm/h时，上样量为3mL（柱体积的7.5%）；流速为100cm/h和150cm/h时，上样量为8mL（柱体积的20%）
|
流速(cm/h) |
蛋白峰(mL) |
半峰宽(mL) |
盐峰(mL) |
半峰宽(mL) |
Rs |
|
50 |
15.21 |
3.29 |
30.67 |
5.3 |
1.7998 |
|
100 |
19.21 |
7.7 |
33.33 |
8.78 |
0.86 |
|
150 |
18.56 |
8.42 |
34.09 |
8.82 |
0.9 |
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