犬猫交叉配血方法
(康乐佳宠物医院
玲玲)
交叉配血实验(corss-match test)是同种异体肾移植手术前必须做的检测。广泛应用于临床输血前检查。将供血者的红细胞与受血者的血清进行血清配合试验,称为主侧试验(major
crossmatch);把受血者的红细胞与供血者的血清作配合试验,称为次侧试验(minor
crossmatch)。这样既可检验血型是否适合,又能发现他们的红细胞或血清中是否还存在一些其它的凝集原或凝集素,是否可引起红细胞凝集反应。减少显微血管吻合后出现血栓的可能。交叉配血试验,在
37℃下进行,以保证可能有的凝集反应得以充分显示。具体步骤如下:
a.
分别从供体和受体采血1ml,用EDTA抗凝。
b.在离心机内离心1min(1000rpm)。吸出血清至另一标记好的试管内
c.受体和供体的红细胞分别配制成2%红细胞混悬液:抽取0.1ml
红细胞至另一试管内,并 加入0.9%NaCl 生理盐水5ml。充分混匀
d.清洗红细胞:将上述混悬液离心1min(1000rpm),用吸管吸除红细胞上方的生理盐水,然后再加入0.9%NaCl
生理盐水5ml,混匀后再重复上述操作。至少清洗红细胞3遍。最后配制成清洗后的2%红细胞混悬液。
e.主侧试验:吸取受体的2滴血清和供体的2滴2%红细胞混悬液至一试管内混匀。
次侧试验:吸取供体的2滴血清和受体的2滴2%红细胞混悬液至另一试管内混匀。
为了便于对照,分别将自体的2滴血清和自体的2滴2%红细胞混悬液至一试管内混匀。
置于37°温箱内温浴30min。
f.检查试管内红细胞是否出现凝集反应、是否溶血。吸取一滴试管内血清红细胞混合液滴至载玻片上,在400倍显微镜下观察是否有红细胞凝集。
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