绿叶中色素的提取和分离实验的方法的改进

1、提取色素    

获取高浓度色素提取液是该实验成功的一个关键环节。一般要求色素提取液呈墨绿色。为了得到墨绿色的色素提取液，可尝试：

（1）称取新鲜绿色叶片 2g放入研钵中，杵和研钵一起放入冰箱中-20℃冷冻4～5h，然后取出进行充分研磨，在加入6ml色素提取液，用4层纱布过滤，将滤液收集到试管或小烧杯中备用。

（2）称取2g质地柔软、深绿色的草本植物的叶片，除去粗的叶脉和叶柄，分多次加入研钵，当碎叶片被研磨成粘粘的叶泥以后，再继续加入少许碎叶片接着研磨，直到把所有的碎叶片全部研磨好，研磨时可向研钵中加入少量的二氧化硅和碳酸钙，待研磨充分后，再加入少量的氯化钠（氯化钠是强电解质，能破坏色素中的胶体物质，有利于色素的释放）和6ml色素提取液，就出现了深绿色的液体。采用4层纱布包着研磨物并挤出滤液，得到墨绿色的色素提取液。

  （3）将鲜菜叶放在40～50℃的烘箱中烘干研碎即得干叶粉。实验时将1.5g干叶粉放入大试管中，加入无水乙醇10ml，用玻璃棒搅动。10min即可过滤。

2、制备滤纸条  

根据实验所选的试管大小，将干燥处理的滤纸顺纸纹方向剪成长方形纸条，在纸条的一端1.5cm处折一条细线，并剪去内角（剪角时最好使其与端线成70～80℃夹角），另一端直接用回形针夹住滤纸条。

3、划滤液细线 

    (1）用盖玻片代替毛细吸管划滤液细线——“印泥法”。把滤液滴入培养皿盖中，偏转培养皿盖，让滤液缓慢流动，并使其面较宽。滤液流过之后，就在培养皿盖底板上沾附一薄层滤液，用盖玻片一侧边缘蘸取滤液，沿滤纸条上细线轻按一下，待干燥后再重复几次。印出的色素液线（最佳宽度为1～2mm）又细又齐又匀，分离效果好。

    (2）点样法。用细毛笔、蘸水笔或注射器吸取少量色素提取液点到滤纸条上或圆形滤纸中央。 

4、分离色素   

（1）将3ml层析液倒入试管中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）轻轻插入层析液中，随后用棉塞塞紧试管口。注意不能让滤液细线触及层析液。

（2）取平面培养皿1只，将一圆形定性滤纸盖在培养皿中，在圆形滤纸中央滴上2～3滴色素提取液，静置1min，然后依次滴3～5滴层析液，每滴中间间隔30s左右，然后盖上培养皿盖。几分钟后，圆形滤纸片上呈现出4个同心的圆环，由内而外分别是黄绿色、蓝绿色、黄色和橙黄色。实验效果明显。此实验方法关键   

    有两点需注意：一是几次滴液体要在同一点上，否则不能形成圆环；二是要掌握好滴层析液的量和时间，否则会影响效果，甚至失败。