实验原理

当经荧光染色或标记的单细胞悬液放入样品管中，被高压压入流动室内。流动室内充满鞘液，在鞘液的包裹和推动下，细胞被排成单列，以一定速度从流动室喷口喷出。在流动室的喷口上配有一个超高频的压电晶体，充电后振动，使喷出的液流断裂为均匀的液滴，待测细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正、负不同的电荷，当液滴流经过带有几千伏的偏转板时，在高压电场的作用下偏转，落入各自的收集容器中，没有充电的液滴落入中间的废液容器，从而实现细胞的分离。

实验流程（以分选有核红细胞为例）

1.采抗凝血10 ml。

2.密度梯度分离单个核细胞层

（1）在短中管中加入适量淋巴细胞分离液。

（2）取肝素抗凝静脉血与等量Hank's液或RPMI1640充分混匀，用滴管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，注意保持清楚的界面。水平离心2000 rpm×20分钟。

（3）离心后管内分为三层，上层为血浆和Hank's液，下层主要为红细胞和粒细胞。中层为淋巴细胞分离液，在上、中层界面处有一以单个核细胞为主的白色云雾层狭窄带，单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞。此外，还含有血小板。

（4）用毛细血管插到云雾层，吸取单个核细胞。置入另一短中管中，加入５倍以上体积的Hank's液或RPMI1640，1500 rpm×10分钟，洗涤细胞两次。

3.免疫荧光染色

将上一步得到的单个核细胞层按1×10/1的比例加入异硫氰酸(FITC)标记的CD71单克隆抗体(鼠IgM)，孵育30 min后重悬于0.5 ml PBS 液中进行荧光染色。

4.FACS分选CD71阳性细胞

http://s14/mw690/002ZF4cqgy6V49CFVMx1d&690

服务说明

1.客户提供血液样本。

2.我们提供图片和分离后的细胞。

3.实验周期为2周左右，具体根据实验内容而定。

另细胞流式分选时需要新鲜样本，考虑运输等问题，本实验室暂不接外地流式分选服务，建议大家最好找本地做。