ChIP引物设计原则
(2013-08-08 10:18:56)
标签:
chip引物实验设计 |
分类: ChIP染色质免疫沉淀 |
问:要设计PCR引物检测富集的DNA片段的话,引物设计在转录起始位点上游多少范围合适?
答:一般是在上下游100-150个碱基左右设计pcr引物的,不知道你这个和别的pcr引物有什么不同,你也可以自己适当加减一些试试,看看下面的那些值,比如是否形成二聚体了,错配等等。
问:已知序列,预测到某个转录因子,ChIP中PCR引物如何设计? 是否根据已知序列转录因子结合位点两端设计引物,还是只要接近该位点都行?
答:不需要那么精确的,首先你要找到目的基因启动子区,也就是转录起始位点上游2000bp以内(也有说1000bp以内的),理论上说,转录因子就是结合在这段序列上的,,然后你在这段序列上设计引物,你可以在不同位置设计3、4对引物,产物的长度不要太大,基本上是设计在转录因子结合位点两端,长度大概在100-200bp左右。
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