以下文章转载与网上,见到好的文章与大家一起分享下:如果需要提供流式细胞检测服务的可以联系我.第一个图用散射光为坐标,反映细胞大小,黑色区域被认为是细胞碎片,从而不被计在进行荧光检测的范围内。体积太大的会被认为是聚集的细胞，同样不被计。第二个图表明了转染效率，只有0.43%，所以图上也见不到第二个峰。
http://s1/orignal/4710c8f3d541b178746b0
此图由友情赞助，在此表示衷心的感谢！
准备工作：先往六孔板里每个孔加入消化液，消化结束后加入大量PBS置于离心管中离心，除去上清液，再加入大量PBS重复一次。目的是除去可能未被细胞吞噬的荧光物质，并顺便除去消化液。洗净后加入1mlPBS，置成悬浮液，再转到EP管里。
流式做起来非常快，根据荧光物质的发射波长选好光路通道后，几乎几秒结果就出来了。坐标图上横轴是荧光强度，纵轴是细胞计数。进样后可以看到细胞的数目随着时间的增加而不断增多。未吞噬的细胞则聚集在离横轴零点不远的位置，从而形成两个峰。第二个峰越强，说明细胞对荧光物质的摄取率越高。
做流式要求细胞密度非常大，我在一个孔里种了将近二十万细胞，但仍然不够。所以下回再做是可以将一满瓶细胞都种进六孔板里。
并注意要用未给药的细胞做阴性对照，可以进行图像的层叠overlay。
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(2012-11-21 16:56:30)