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多聚甲醛固定的细胞可以多久才检测

(2012-10-23 10:54:51)
标签:

多聚甲醛

细胞数量

固定细胞

流式细胞

细胞周期

杂谈

分类: 流式细胞检测服务文献

  多聚甲醛固定的细胞可以多久才检测?如果必须分次收集细胞,那么,请用4%多聚甲醛固定后放在4度冰箱保存,放一周应该不会影响后期操作。

  4% 多聚甲醛作为固定液的具体使用方法:

1.在孔板中直接加入4%多聚甲醛。静置15min,用PBS洗2遍就可以了。

2.用玻璃刀将载玻片切割成小块,大小根据你细胞种在哪个培养体系具体定。一般使用24孔和6孔板。切割好的玻片高压灭菌,然后用多聚赖氨酸(具体浓度请你自己查)溶液浸泡,随后取出,超净台下凉干,这样就制备好了包被过的玻片,有利于细胞贴附、爬板。其余的试剂和材料与一般的细胞培养一致。将细胞消化下来,配成合适的细胞悬液,种入已放有包被过的载玻片的培养板中,常规培养。但注意,取放板子要轻柔,不要频繁移动载玻片。一段时间后你就会看见细胞在玻片上涨起来了,等到细胞数量合适,超净台下用镊子取出载玻片去做免疫组化就OK了。(嫌麻烦,玻片不包被也行)

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