为什么不能用甲基绿对提纯的DNA鉴定？
判断“在DNA粗提取和鉴定实验中，能否可以用甲基绿代替二苯胺对提纯的DNA进行检测？”，答案是否定的，为什么？

原因可能是甲基绿易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色，而且是在常温下进行的反应，对于聚合程度低的DNA则不容易结合；而二苯胺与DNA相遇会变成蓝色的原理是：DNA在酸性条件下加热，其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂，生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸，而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊糖，与二苯胺试剂反应生成蓝色物质，这一反应的条件是在沸水浴环境下进行的。显然甲基绿和二苯胺与DNA进行的颜色反应的原理和反应的条件是不一样的，而对于提纯了的DNA，更适合用二苯胺在沸水浴条件下进行检测。
附：2011年深圳高三理综Ⅰ模第24题：下列有关实验的叙述，正确的是（答案：BD）

A.在DNA粗提取和鉴定实验中，可以用甲基绿代替二苯胺检测

B.用斐林试剂检测还原性糖时，可以用葡萄汁代替苹果或梨匀浆

C.在观察洋葱根尖细胞有丝分裂时，可用表皮细胞代替根尖细胞

D.平板划线法和稀释涂布平板法是微生物接种的常用方法

吡罗红又名派洛宁，所以有些资料或者题目会出现甲基绿—派洛宁的表述，实质与甲基绿—吡罗红的表述是一样的。

二苯胺法的原理是:DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ酮基戊醛,它再和二苯胺作用而显现蓝色(溶液呈浅蓝色)。

DNA的鉴定一般用两种试剂：甲基绿和二苯胺
甲基绿—哌洛宁对DNA和RNA有选择性的染色效果。碱性的甲基绿-哌洛宁混合染料处理细胞后，由于DNA、RNA对染料具有的亲和力不同， 而使这两种染料对两类核酸具有了选择性。 DNA被甲基绿染成绿色，RNA被哌洛宁染成红色， 这样就能使细胞中两种核酸分布显示出来。

二苯胺法的原理是:DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ酮基戊醛,它再和二苯胺作用而显现蓝色(溶液呈浅蓝色)。

至于步骤，我以鸡为例，简单说下吧
（1）应用低渗原理和机械搅拌使细胞破裂并过滤。本步骤直接决定提取的核物质的多少及实验结果。教师应给予非常关注。
（2）溶解细胞核内DNA。加2 mol/L的NaCl溶液并用玻棒搅拌。
（3）析出DNA黏稠物并过滤。关键步骤：注意①注蒸馏水要慢，防过量而使DNA重新溶解（把握浓度达0.14 mol/L）。②轻轻沿同一方向搅拌，有利于DNA析出、附着、缠绕。
（4）再溶解DNA黏稠物并过滤。用浓度为2 mol/L的NaCl溶液。
（5）提取含杂质较少的DNA。用预冷的95%的酒精。因其①可抑制核酸水解酶活性，防止降解。②降低分子运动，易析出沉淀。③低温利于增加DNA柔韧性，减少断裂

甲基绿是绿色的。它能使DNA染绿色。也就是说不管有没dna都是绿色。根本无法鉴定。但如果有吡罗红就不同。红加绿必定不是绿色。但如果有DNA。那就会被染成绿色。从而鉴别出DNA