用于生物荧光标记的花菁染料
(2012-08-08 08:29:33)
标签:
花菁染料荧光toyocy3cy5杂谈 |
分类: 荧光染料 |
1856
年Williams
发现了菁染料(亦称花菁)。一百多年来,人们对花菁的性质和应用做了深入研究探索。
最初,人们重点研究菁染料在感光方面的应用。近红外菁染料作为光谱增感剂, 在照相化学领域起着重要的作用。
随着半导体激光技术的发展,人们开始利用菁染料摩尔消光系数高、光谱范围广且光量子产率高等特性, 将其应用于生物荧光标记。菁染料已成为在DNA、蛋白质及核酸等分析检测中使用的主要荧光探针。
目前研究比较活跃的菁染料主要有两大类,一类是TO(thiazole orange) 、YO(oxazole orange) 系列及其二聚体染料, 另一类是多甲川系列菁染料。
TO、YO系列及其二聚体染料
TOTO 和YOYO 是分别由单体噻唑橙TO 和噁唑黄YO 通过一个多亚甲基胺柔性链连接成二聚体。TOTO 和YOYO 是由Glazer 开发的一类对dsDNA具有高度亲和力的不对称菁染料。TOTO 和YOYO染料在溶液中无荧光,降低了检测过程中的荧光背景干扰。与dsDNA 结合后发生强烈的荧光,荧光增强约1000 倍。
多甲川菁染料
甲川菁染料中间为多次亚甲基桥,两端为噻唑、噁唑、苯并噻唑和苯并噁唑等杂环。中间或两端可修饰上多种基团,以获得优良性质。由Waggoner 等开发的一类多甲川类花菁染料,当中间的共轭双键数n 是1、2、3 时,分别为CY3、CY5、CY7 系列菁染料。其中代表性化合物CY3 和CY5作为新一代的商品化荧光标示剂。
花菁染料的摩尔吸收系数大,荧光发射波长范围宽,一般在600~1000nm 的近红外区,可大大避免生物自身的荧光背景干扰,与成本较低半导体激光器匹配,用于DNA 自动测序、聚合酶链反应(PCR)检测及荧光免疫分析等。