如何看XE2100和XE5000的DIFF散点图

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分类: 血液细胞分析 |
关于报告参数和Flag报警的散点图来源知识,可以在更高层次上指导对仪器状态和配套试剂进行调整。
为了帮助大家对XE2100和XE5000维修和调试,需要对XE2100的散点图有所了解,这些散点图的基础部分同样适用于XT2000和XS1000等机型。
基础讲解
最常用的白细胞分类DIFF(differential)散点图
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首先介绍一下DIFF散点图中的两个坐标轴所对应的检测通道:
SSC轴,代表侧向散射光(Side SCatter,SSC)的信号强度
SFL轴,代表侧向荧光(Side FLuorescence,SFL)的信号强度
DIFF散点图中,利用侧向散射光SSC和荧光SFL将白细胞分成如下几个亚群:
中性粒细胞NEUT(neutrophilic granulocyte)
单核细胞Mono(mononuclear leucocyte)
淋巴细胞Lymph(Lymphocyte)
嗜酸性粒细胞EO(eosinophilic leucocyte)
嗜碱性粒细胞BASO(basophilic leucocyte)
由于嗜酸性粒细胞BASO的比例很小,而且通常和中性粒细胞NEUT混在一起,很难区分。通常采用另外一个专用的BASO通道进行检测。所以DIFF通道通常提供白细胞的四种分类(中性NEUT、单核Mono、淋巴Lymph、嗜酸EO)。
侧向散射光SSC通常反映了细胞内部颗粒结构的复杂程度。例如,嗜酸性粒细胞EO由于内部颗粒特征明显,其侧向散射光SSC信号最强,落在DIFF散点图的最右方。
由于荧光染料通常和细胞中的DNA/RNA核酸结合,所以侧向荧光信号SFL通常反映了核酸的含量的多少,反映了细胞发育的成熟程度。
DIFF散点图中,淋巴和单核细胞之间的间隔比较小。可以通过调整SSC和SFL通道的增益进行微调,在调整过程中,需要注意对幼稚细胞报警和细胞碎片的影响。
下面将对DIFF散点图形态与未成熟粒细胞报警(IG)和血影碎片区(Ghost)进行讲解
高级讲解
2003年9月8日,Sysmex的新参数未成熟粒细胞(immature granulocyte ,IG)通过了美国FDA的审批。
该参数作为XE2100的一个算法软件升级包被单独出售。XE5000中则标配了该软件包,可以对IG细胞进行定量测量,并且由此宣称实现了白细胞的六分群(6-part Differential)。
http://s7/middle/9a3c699ftc112344b5146&690
占白细胞最大比例的粒细胞完整的生长要历经原粒细胞(Myeloblast)、早幼粒细胞(Promyelocyte)、中幼粒细胞(Myelocyte)、晚幼粒细胞(Metamyelocyte)进而分化为成熟的杆状核和分叶核粒细胞。在粒细胞的成熟过程中,其细胞中的核酸含量逐步减少。
实际上,IG检测只是利用了粒细胞成熟过程中的不同阶段核酸含量不同所导致的荧光信号强度变化,通过算法处理将未成熟粒细胞IG(包括早幼粒细胞Promelocyte, 中幼粒细胞Myelocyte, 晚幼粒细胞Metamyelocyte)从成熟的中性粒细胞群主体(NEUT+BASO)中分离出来,但其在DIFF散点图上的视觉表现仍然是连接在一起的。
对于DIFF通道侧向荧光SFL通道增益的不当调整,会影响未成熟粒细胞IG的检测和核左移、异常淋巴等的Flag报警。同时,也会导致散点图左下角血影碎片区(Ghost)中的碎片等虚假信号过多,干扰白细胞的有效信号。
(完)