“pH对酶活性的影响”实验中指示剂的选择

 .1  不能用碘液作指示剂

    pH对酶活性的影响”实验中，能否用碘液检测淀粉是否消失来作为显示实验结果的方法？笔者认为

    不能。因为在碱性条件下，碘分子可与NaOH发生反应，生成NaI和NaIO 。

    I2 + 2NaOH == NaI + NaIO +H2O

    这样碘单质转化成I- 跟 IO-。碘单质遇淀粉变蓝，I- 跟 IO-遇淀粉并不变蓝。因此只有在中性和酸性条件下，碘才能使淀粉变蓝，而在碱性条件下，碘不会使淀粉变蓝。事实上，淀粉与碘的蓝色反应在pH=3～5的弱酸性溶液中进行最灵敏，在pH<8的弱碱性溶液中次之，在强酸性溶液中，反应呈现蓝紫色，在pH>9的碱性溶液中不显色。

   本实验不能用碘液作鉴定试剂，因为I2不能长时间留在碱液中，I2会与NaOH发生化学反应，很快生成NaI（碘化钠）和NaIO（次碘酸钠），使I2与淀粉生成蓝紫色络合物的机会大大减少，从而影响实验的观察效果。

   该实验分别用盐酸、氢氧化纳和蒸馏水设置三种不同的PH值，来探究不同pH下淀粉酶活性的大小。本实验不能用碘液作鉴定试剂，因为在碱性实验组，加入碘液后，I2会与NaOH溶液反应，很快生成NaI和NaIO，使I2与淀粉结合形成络合物的机会大大减少，这样会与中性条件下的对照组一样，混合液都不会变蓝，整个实验导致失败。

 .2  不能用斐林试剂作指示剂

  本实验也不能用斐林试剂作鉴定试剂，因为斐林试剂只能在碱性环境中起作用，而在酸性实验组中，加入斐林试剂后，盐酸会与斐林试剂发生中和反应，使斐林试剂失去鉴定作用，即使酸性条件下淀粉酶仍具有活性，使淀粉水解成还原糖，也不能通过斐林试剂检验出来。

 .3  课标教材建议改用过氧化氢酶进行此实验

  综上所述，该实验既不能用碘液作鉴定试剂，也不可用斐林试剂作鉴定试剂。而要探究PH值对酶活性的影响，只能改变反应底物和酶，因此新课标建议改用过氧化氢酶催化过氧化氢的分解来完成此实验，这样就回避了鉴定试剂的选择问题。

  老教材上“影响酶活性的条件”实验中用的都是淀粉酶，课标教材上建议用淀粉酶探究温度对酶活性的影响，用过氧化氢酶探究pH对酶活性的影响，这种改变必有原因。这个原因恐怕就是用淀粉酶探究pH对酶活性的影响时指示剂不好选择吧。

（本话题由常正良老师发起并整理成文）（《中学生物教学》互动稿）