人淋巴细胞来源于人外周血，可根据不同实验目的可选择密度梯度离心法、吸附分离法或其它特殊分离方法。Böyum在密度梯度离心法的基础上提出通过使用Ficoll®甲泛影钠溶液离心快速分离的方法，操作更方便、更快速。稀释的血液在Ficoll®甲泛影钠溶液中通过短时间的低速离心即可分层，红细胞和粒细胞沉降至管底、淋巴细胞和血小板在中间形成2个分层。MPBio生产的LSM，成功地用泛影酸钠代替了甲泛影酸钠，是一种灭菌过滤溶液，每100毫升包含6.2克聚蔗糖和9.4克泛影酸钠。密度是1.0770-1.0800克/毫升(20℃)。  

方法：
    除去血液中的纤维蛋白或肝素处理血液以1：1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释，在分离溶液中分层，低速离心30分钟。通过离心，迁移能力不同最终形成不同的细胞层。
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大部的红细胞和粒细胞通过梯度迁移形成颗粒状。由于其密度不同，淋巴细胞和其他单个核细胞（单核细胞和血小板）分布在在血浆和LSM两层中间。淋巴细胞可以通过回抽分层回收，在进一步去除血小板，LSM和血浆。

使用说明：
以下的操作步骤是最初由Böyum.设计的程序的众多改良版本中的一种。此程序的改良是通过运用除去血液中的纤维蛋白或抗凝血剂处理人体血液；这种改良对于其他物种来源血液或者其他组织非常有必要。
1. 轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合
2. 无菌转移3 mlLSM到15 ml离心管中。

3. 混合2 ml除纤维蛋白血液或肝素处理血液 和2 ml 生理盐水
4. 仔细的将稀释血液加入3 mlLSM（室温）于15ml离心管中，在血液和LSM中形成一个明显的分层。不要将稀释血液混合入LSM中。
5. 室温下400g离心15-30分钟，离心可以沉淀红细胞和多核白细胞同时可以在LSM上形成一层单核淋巴细胞，如上图所示。
6. 吸出淋巴细胞上方2-3mm的血浆。
7. 吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM和转移到另外的一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至淋巴细胞离心管中，室温离心10分钟，离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞即刻，例如160 – 260 x g（去除LSM和降低血小板的百分比）。
8. 用平衡盐缓冲液清洗细胞，用适当的培养基重悬细胞.