1935年，浙江“阳春舞台”戏班，在一座古庙台演出《三看御妹》。忽然，童养媳竺春花被两个大汉和一个婆娘赶至戏班。戏班当红花旦月红（曹银娣 饰）见春花可怜，求班主和尚阿鑫将其收留，并且二人结为金兰姐妹。

      戏班在班主和尚阿鑫、邢师傅（冯奇 饰）的主持下，加上月红、春花二位台柱的影响力，每到一处演出，生意都不错。戏班到绍兴演出时，当地豪绅倪三看中月红，欲调戏月红未逞，便勾结警察所长，以女子唱戏败坏道德风尚为名，要逮捕月红。春花（谢芳 饰）为掩护月红，被警察绑在桥头示众，邢师傅也被警察打成重伤后死亡。为了料理邢师傅的后事，月红和春花只好画押卖身于班主阿鑫。阿鑫解散了戏班，带月红、春花到上海的某戏院找唐经理，正巧当红花旦商水花患病，唐经理便答应让月红、春花顶替。月红、春花一上台便引起台下观众一片叫好声，很快二人便走红大上海，戏班台柱商水花“越剧皇后”的地位被月红所顶替。唐经理把月红、春花当成摇钱树，也发了大财。

      后来，唐经理（李纬 饰）企图利诱月红和春花演出格调下流的剧目，被春花拒绝。但是，月红随着名气越来越大，渐渐看不起兄弟班的姐妹们。她在灯红酒绿的迷醉中，落入唐经理的圈套，以至堕落，委身于唐经理，并嫁给了他。被唐经理始乱终弃的商水花（上官云珠 饰）愤而自杀。春花看透唐经理的丑恶面目，不希望月红自甘堕落，经常劝她，月红不但没有回心转意反而怨恨春花。春花在新闻记者江波（高放 饰）的进步思想影响下，组织姐妹班演出了根据鲁迅小说改编的《祝福》，受到观众的欢迎。唐经理再度力捧月红，欲挤走春花。姐妹俩彻底决裂。随后，春花团结越剧界的姐妹们，准备联合公演进步戏。唐经理为破坏他们的演出与国民党市党部潘委员相勾结，指使阿鑫（邓楠 饰）企图用石灰弄瞎春花的眼睛。事后，当局怕阴谋败露，为了挽回影响，决定开庭审判。唐经理又胁迫月红供认自己是主谋，妄图将政治迫害化为姐妹恩仇。春花在法庭公开揭露反动派的阴谋。邢月红内心矛盾重重，在法庭上昏死过去。

      解放后，春花随剧团到浙江农村演出，找到了解放前已离开唐经理的月红，帮助她提高了觉悟，姐妹俩又重新合好，开始了新的舞台生涯 。

2018年9月8日，广东卫视播出老电影《舞台姐妹》，再次欣赏。