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艾博思生物《lncRNA干扰之我见》

(2013-05-09 19:23:21)
标签:

lncrna

sirna

效率

设计

功能

分类: ncRNA

lncRNA干扰之我见

http://www.thermoscientificbio.com/uploadedImages/Products/siRNA/Lincode_RNAi/lincode-workflow-3arrows.jpg

问题1lncRNA干扰要比编码蛋白的基因干扰更加困难?lncRNA 的干扰与编码蛋白的基因干扰相比更加难于检测?

回答:

1.     lncRNA大部分都是定位与细胞核内,RNAi机制在细胞质效用远远高于细胞核;

2.     lncRNA是具有高度二级结构的RNARNA的二级结构空间位阻于siRNAlncRNA的结合;

3.     lncRNADNA和蛋白相互结合形成复合体,同样阻止了siRNAlncRNA的结合效率;

4.     lncRNA在很多细胞类型或者模型中表达丰度很低,所以在进行RNAi干扰之前建议进行基因的基础表达水平的检测,做到干扰 前后心中有数

 

问题2:传统的siRNA设计方法是否能够应用于lncRNA

回答:

一般是可以的,同样需要避免off-target效应,设计的基本原则和参数大部分是相通的,可以根据个体需求做相应的调整

 

问题3:一般设计几对siRNA可以有效果?

回答:

一般推荐设计3-5siRNA,选择1-2条最高效的序列进行后续试验。

 

问题4:针对lncRNA siRNA转染试剂是否有特殊需求?

回答:

没有特殊的需求,大部分转染试剂是兼容的,不过后续检测您可以对细胞核和细胞质的RNA分别进行抽提和检测。

 

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