加载中…SYBR Green I 核酸染料(胶染与P荧光定量PCR）
(2012-07-17 13:35:58)
标签：
凝胶电泳聚丙烯酰胺sybri核酸染料教育 |
分类： PCR |
SYBR Green
I
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IBS01
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SYBR Green
I(电泳染色用)
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100ul
500ul
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询价
询价
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SYBR Green
I(荧光定量PCR用)
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询价
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SYBR Green I 适合于多种凝胶电泳方法：琼脂糖凝胶，聚丙烯酰胺凝胶电泳，脉冲电场凝胶电泳，和毛细管电泳等。
SYBR Green I 与双链DNA的亲和力非常高，因此可以用做电泳前染色，对分子生物学中常用的酶（如：Taq
酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等）没有抑制作用。另外，SYBR Green I 与EB相比，诱变能力大大降低。
SYBR Green I
◆ 高灵敏：至少可检出20pg DNA，高于EB染色法25-100倍。
◆ 信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。
◆ 操作简单：无须脱色或冲洗。
◆ 适用范围广：可适用于多种电泳分析。
◆ 使用方便：不影响其它修饰酶作用。
◆ 经济：价格比银染便宜。
电泳用SYBR Green I 使用方法
SYBR Green I预染方法
◆ 该方法适于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳
◆ 工作液的配制：用电泳缓冲液将10000×的SYBR
GreenⅠ稀释100倍，即为SYBR GreenⅠ工作液。SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。
◆ 制胶：按常规方法制胶，不含任何染料。
◆ 样品染色：向分析样品中加入SYBR
GreenⅠ工作液和载样缓冲液，室温放置10分钟，使SYBR GreenⅠ与样品中DNA充分结合。SYBR
GreenⅠ工作液加入量为总上样量的1/10。
◆ DNA Marker染色：将5μL DNA
Marker和5μL DNA Marker稀释液和1μLSYBR GreenⅠ工作液混匀，室温放置5分钟，使SYBR
GreenⅠ与DNA充分结合。
◆ 上样、电泳：按常规操作。
SYBR Green I后染方法
◆ 按照常规方法进行电泳。
◆ 用PH 7.0 - 8.5 的缓冲液（如：TAE，TBE
或 TE），按照10000：1的比例稀释SYBR GreenⅠ浓缩液，混匀，制成染色溶液。
◆
将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色，将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上，让工作液均匀地覆盖整个胶板，并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理（避免染料吸附在玻璃表面上）。
◆
用蓝盾TM观测。蓝光可透过玻璃，观测聚丙烯酰胺凝胶时，可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入蓝盾TM内观测。
SYBR Green I使用注意事项
◆ 在”SYBR GreenⅠ预染色方法”中，电泳时间不要超过2小时，否则SYBR
GreenⅠ会从DNA上分离出来，会产生弥散状条带。
◆
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SYBR Green I荧光定量PCR
wiki:
概念
SYBR Green I是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的染料。在游离状态下，SYBR Green I发出微弱的荧光，但一旦与双链DNA结合后，荧光大大增强。因此，SYBR Green I的荧光信号强度与双链DNA的数量相关，可以根据荧光信号检测出PCR体系存在的双链DNA数量。SYBR Green I 的最大吸收波长约为497nm，发射波长最大约为520nm。
SYBR Green I核酸染料(电泳用)
SYBR
Green I是高灵敏的DNA荧光染料，适用于各种电泳分析，操作简单：无须脱色或冲洗。至少可检出20pg
DNA，高于EB染色法25-100倍。SYBR Green I 与dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍，用SYBR
Green I染色的凝胶样品荧光信号强，背景信号低。可适用于多种电泳分析。
SYBR
Green I 适合于多种凝胶电泳方法：琼脂糖凝胶，聚丙烯酰胺凝胶电泳，脉冲电场凝胶电泳，和毛细管电泳等。
SYBR
Green I 与双链DNA的亲和力非常高，因此可以用做电泳前染色，对分子生物学中常用的酶（如：Taq
酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等）没有抑制作用。另外，SYBR Green I 与EB相比，诱变能力大大降低。
SYBR
Green I 核酸凝胶染液(SYBR Green Ndcleic Acid Gel
Stains)是一种高敏感性的荧光染液，用于检测琼脂糖凝胶及聚丙烯酰胺凝胶中的双链DNA和寡核苷酸。当染液与核酸结合后，SYBR
Green I 核酸凝胶染液的荧光信号会明显增强，因此经SYBR GreenI
核酸凝胶染液染色的凝胶显示出非常好的信躁比，没有背景荧光。为获得最佳的结果，凝胶最好在跑胶后再进行染色。SYBR GreenI
核酸凝胶染液用于低含量的PCR产物，凋亡研究及异源双链分析中少量DNA的检测较为理想。可应用于：DNA和RNA的检测；SSCP及异源双链分析。
SYBR Green I 核酸染料特点
高灵敏：至少可检出20pg
DNA，高于EB染色法25-100倍。
信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。
操作简单：无须脱色或冲洗。
适用范围广：可适用于多种电泳分析。
使用方便：不影响其它修饰酶作用。
经济：价格比银染便宜。
电泳用SYBR Green I 使用方法
SYBR Green I预染方法
1. 该方法适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳 2. 工作液的配制：用电泳缓冲液将10000×的SYBR GreenⅠ稀释100倍，即为SYBR GreenⅠ工作液。SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。 3. 制胶：按常规方法制胶，不含任何染料。 4. 样品染色：向分析样品中加入SYBR GreenⅠ工作液和载样缓冲液，室温放置10分钟，使SYBR GreenⅠ与样品中DNA充分结合。SYBR GreenⅠ工作液加入量为总上样量的1/10。 5. DNA Marker染色：将5μL DNA Marker和1μLSYBR GreenⅠ工作液混匀，室温放置5分钟，使SYBR GreenⅠ与DNA充分结合。 6. 上样、电泳：按常规操作。SYBR Green I后染方法
1. 按照常规方法进行电泳。 2. 用PH 7.0 - 8.5 的缓冲液（如：TAE，TBE 或 TE），按照10000：1的比例稀释SYBR GreenⅠ浓缩液，混匀，制成染色溶液。 3. 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色，将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上，让工作液均匀地覆盖整个胶板，并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理（避免染料吸附在玻璃表面上）。 4. 用蓝盾TM观测。蓝光可透过玻璃，观测聚丙烯酰胺凝胶时，可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入蓝盾TM内观测。
SYBR Green I使用注意事项
1.
在"SYBR GreenⅠ预染色方法"中，电泳时间不要超过2小时，否则SYBR
GreenⅠ会从DNA上分离出来，会产生弥散状条带。
2.
在常规用酒精沉淀核酸的过程中，SYBR Green I 可以全部从双链核酸上去掉。
3. 如果想对用
SYBR Green I 染过的胶进行 Southern blots，建议在预杂化和杂化溶液中加入 0.1%- 0.3%
的SDS。
4.
在紫外照射透视下，与双链 DNA 接合的 SYBR Green I 呈现绿色荧光。如果胶中含有单链 DNA
则颜色为橘黄而不是绿色。
5. SYBR
Green对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。======================================================================================
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Mix，酶、核酸纯化等产品
代理品牌
免疫学：抗体及其ELISA试剂盒-------Abcam、Epitomics、Abgent（全面的免疫学产品）、Santa
Cruz、CST、R&D
荧光类：SYBR/Biotium
(核酸凝胶染色试剂、EvaGreen荧光染料、CF染料等荧光试剂）
动物类：各种动物模型
综合类：Corning/Axygen/BD/FISHER（耗材）、MERCK、Millipore、Invitrogen、Roche、Sigma等
仪
器：各种类型小型仪器等
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