一.洗脱曲线的检测 

    核酸蛋白检测仪又称紫外检测仪，是液相色谱实验中的一种紫外检测器，配上层析柱、蠕动泵、部分收集器和记录仪等,就组成了一套完整的液相色谱系列装置。

    它是生物化学、分子生物学、基因工程、制药、化工、农业、食品以及医院筹有关科研部门和生产单位在分离分析工作中不可缺少的手段。

    哪条曲线是洗脱曲线？哪条曲线是梯度曲线？

    穿透峰,是指"上样峰",就是与柱子填料不发生反应,直接流出来的成分.

 


    这个上样峰,有二个成分。但改变不了上样峰的特点。因为离子强度还没有开始提升。

    核酸蛋白检测仪系列产品,是液相色谱中具有紫外吸收物质(蛋白、核酸、多肽、酶)的一种紫外检测装置，可直接读出光密度A值，且波长准确度和重复性高、单色性好、定性、定量分析中能直接记录各个峰面积的相对峰面值，并能计算相对的含量。

    1. 分辨率：1nm

　　2. 核酸蛋白检测仪波长范围：254nm、280nm﹙214nm﹚

　　3. 量程灵敏度范围：0-100℅T、0-2A、0-1A、0-0.5A、0-0.2A、0-0.1A、0-0.05A、0-0.02A、0-0.01A.

　　4. 检测下限：1ng/ul 检测上限：5000ng/ul

　　5. 吸光率精确度：0.002 Abs(1mm光程)   吸光率准确性：±1%(at 0.76 at 257nm)

　　6. 吸光率范围：0.01-100Abs

　　7. 记录仪输出：10mV

　　8. 积分仪输出：0.1A/mV

　　9. 流式样品池：容积100微升、光程5毫米　　(微量样品池：容积80微升、光程3毫米)

　　10.数显模式：固定A量程读数(0-2.0A)：可变A量程读数(0-2.0A、0-1.0A、0-0.5A、0-0.2A、0-0.1A、0-0.05A、0-0.02A、HD-21C-B型)

　　11.显示方式：主机LED数字显示2个OD值表。

　　12.滤色器：由254nm、280nm等干涉滤色片组成;(6)最大流量：10 ML/min(特殊需要可另配)

　　13.配接记录仪信号：0-10MV

　　14.量程在0.05A档时：噪音≦0.002A

　　15.工作环境温度：-5～35℃。

　　16.基线噪音：2×10-4;LED数字显示;仪器可连续工作1个月

　　17.仪器工作时不受到任何震动，周围不受磁场干扰。

　　18.电源：220VAC±10PHZ ⑿.主机重量：5kg

    有的仪器是这样的：

    1.测试波长：254nm，280nm（特需波长根据用户要求另配）

　　2.流式样品地容积：100微升，光程3mm。（特需样品池根据用户要求另配）

　　3.量程范围：0～100%T,0～2A,0～1A,0～0.5A,0～0.2A,0～0.1A,0～0.05A

　　4.量程在0.05A时，噪音≤0.001A

　　5.仪器可连续工作

　　6.电源AC220V士200、50Hz（机内带自动交流稳压器功能装置）

　　7.温度－5℃－30℃

　　8.外型尺寸：260x160x155（mm）

　　9.主机重量：4kg

    核酸蛋白检测仪*操作步骤
    一、直接观察数显窗口检测柱层析分离分析过程

    二、从电脑屏幕窗口检测柱层析分离分析过程

　　1)选定所需波长(254mm 或 280mm)的干涉滤光片。从有机玻璃盒中取出干涉滤波片，插入仪器背后“滤光片”下面小长方孔内，并使其插入到底部位置。插入时应注意使干涉滤光片侧面有一直径为 3mm 的半球形凹槽朝上。 随机安装的是 280nm 滤光片。

    2)在仪器使用前，首先连接好所需配套仪器：层析柱、恒流泵、自动部分收集器、记录仪(或电脑色谱工作站)。将各类插头与插座接妥(220V电源)。置电源开关在“ON”位置，仪器预热 30 分钟。　　

    3)选定检测样品吸光度或透过率

　　a. 透过率：按下按键开关“T”键， “透过率 T”指示灯亮。调节“调 T”旋钮， 顺时针调节透过率增大。 观察数值变化至 “100” (此时透过率 T 为 100%) 。 当洗脱样品流过检测仪(样品池下端为进口)时,数显窗口将直接显示样品的透过率 T。

　　b.吸光度：按下按键开关“T”键，调节“调 T”旋钮，使透过率 T 为 100%，然后按下“2A～0.05A”任何一键， “吸光度 A”指示灯亮，吸光度 A 应 为零，如果显示不为零，可调节“A 调零”旋钮。当洗脱样品流过检测仪时，数显窗口将直接显示样品的吸光度 A。

    4) 把检测仪进样口聚乙烯塑料管接到层析柱上，使凝胶层析柱中缓冲液流过检测仪(恒流泵流量，视凝胶层析柱大小，选1-3ml/min)。用“调零”调整吸光度A值为0(量程开关拨到100%T调节光量旋钮，使记录仪指针在10mV数字显示为100，即透光率为100%。把量程开关拨到“0.05A”档，缓慢调节A调零旋钮，使记录仪指示在“O”位，检测仪显示为“O”)。

    5) 以上步骤结束，析系统平衡后即可用洗脱液开始洗脱样品，洗脱前再调一次吸光度0点。洗脱过程结束前不可再调节“调零”旋钮。当洗脱液流过检测仪时，吸光度显示大于零的数值，吸光度数值大小随样品的浓度而变化。洗脱完毕后吸光度显示为稍大于零的数值。

　　6）如A量程开关选定在0—0.5A时，则记录纵坐标满量程光吸收A读数为0.5，当信号指示在纵坐标一半(50%刻度)位置时即为0.25A。

　　7）测试完毕后，必须切断电源，并用蒸馏水清洗样品池和聚乙烯塑料管。

    注意事项：

　　1. 开机前先检查滤光片是否安装到位，严禁在没有安装滤光片的情况下开机!! ! 以免损坏仪器。

　　2. 层析系统平衡后(一般装柱后须平衡数小时) ，即开始加样前再校对一次 100%T 或吸光度基线，加样后不可再调节仪器所有旋钮。

　　3. 实验结束后，在样品池进口串入恒流泵，用蒸馏水清洗 10 分钟以上，直到检测仪显示： “T”大于 100%， “A”小于 0。这样不会因样品池有污垢，而影响仪器检测灵敏度和精度。

　　4. 实验结束后取出干涉滤光片置于有机玻璃盒中，并保持盒中干燥，防止接触有害气体，禁止用水或有机溶剂擦拭滤光片表面。

　　5. 仪器应避免在强光下工作。在仪器通电情况下不得取出样品池，以免仪器内光电器件受损。

　　6. 环境温度过低，仪器背面“光源”灯不亮时，按“光源辅助启动”即可。

　　7. “A 显示选择”键，按下时吸光度数值随量程改变而改变;放开时吸光度数值不随量程改变而改变。此键为辅助键，一般情况下不使用。

    二. 梯度曲线的检测

 电导率测定仪

测量范围：0-2×104μS/cm；    稳 定 性：±1%       测量误差：±1%F.S；          标配电极：J=10

 可选配电极规格常数(J)有三种：1.0、10

 可配HD-4/HD-5检测仪

 自配电脑：可实现“A”值与电导率的同步显示 (用于离子交换、疏水、分子筛凝胶、亲和等层析实验，与HD-4/HD-5配套，可实时绘制样品浓度和离子强度两个关键因素的同步变化，也可用于检测溶液电导率连续变化的场合)

 系统要求：XP操作系统(两个RS232C串口)